谢佳芮，寇美玲，苗海生

(云南省畜牧兽医科学院/云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室/农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室，云南 昆明 650224)

分离和鉴定病原体是诊断感染性疾病的传统策略和金标准方法，也是开展后续研究的基础，但需要专业资质的实验室和技术人员，且耗时耗力，在操作人兽共患病原体时还存在较高的生物危害风险。随着分子生物学的快速发展，以聚合酶链式反应(PCR)为代表的核酸扩增技术，如实时(定量)PCR、多重PCR、免疫捕获PCR和PCR-ELISA，凭借其高准确性，正在成为替代病原分离的重要诊断手段。然而，PCR技术存在一些固有的缺点，即需要精密的核酸扩增仪才能实现在不同时间维持所需的不同温度，常规PCR还需要电泳分析扩增结果。世界卫生组织认为，理想的诊断检测技术应是敏感性高、特异性强、使用成本低、操作简单快捷、可用于任何环境条件下同时容易获得操作仪器[1]。因此，发展和使用快速、可视化的现场诊断技术，对防控疫病具有重要的现实意义，也是当前的重点研发方向。为克服PCR技术的短板，Notomi等[2]2000年发明环介导等温核酸扩增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)技术，因其易于操作，有望作为替代PCR技术的分子诊断工具[3]引起研究人员的广泛兴趣。经过20年的发展和完善，LAMP技术已有重要进展，有必要做一个回顾评价。

1 LAMP技术原理

LAMP仍是基于核酸扩增的分子诊断技术，但区别于传统的方法，其核心和特别之处是使用一种链置换DNA聚合酶(BstDNA polymerase)和2对引物(也可以是3对引物)进行核酸扩增反应。……