罗弼豪，韩雪英，常振宇，郭抗抗

(1.西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100；2.西藏农牧学院动物科学学院，西藏林芝 860000)

副乳房链球菌(Streptococcusparauberis，Spu)是一种球型、短链状排列的革兰氏阳性菌，无运动性，能够引起多种动物疾病并表现出血性败血症、眼球突出症、脑膜炎、恶病质等临床症状，在短时间内病死率可达50%以上，给养殖业造成了极其严重的损失[1]。1996年，该菌最早发现于西班牙北部的大菱鲆养殖场，被认定是鱼类的一种重要病原菌[2]。此后，在污染的肉制品、奶牛乳房炎乳汁和病死猪肺脏中相继分离鉴定出副乳房链球菌[3-5]，但是目前并没有关于牦牛源副乳房链球菌的相关报道。2019年，对青海省某养殖场出现呼吸道疾病的牦牛肺脏组织进行了细菌培养，通过对分离菌的形态特征观察、生化试验、16S rDNA序列分析等确定了3株副乳房链球菌，并进行了小鼠致病性试验和药物敏感性研究，旨在为牦牛中副乳房链球菌的基础研究和防控提供数据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验样品与实验动物 肺脏组织采自青海省某规模化牦牛养殖场，无菌采集后，干冰保存并及时送实验室进行细菌分离。4周龄～6周龄清洁级昆明小鼠30只，雌雄各半，体重20 g左右，购自华中农业大学实验动物中心。

1.1.2 主要试剂 血平板，青岛海博生物技术有限公司产品；胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)、胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)，武汉科瑞生物技术有限公司产品；标准小牛血清、pMD19-T 载体、大肠埃希氏菌DH5α，北京天根生化科技有限公司产品；……