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猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

2021-02-06周景云刘百红刘雪微杨欣艳李宝春陈西钊

畜牧与兽医 2021年2期
关键词:血清检测

周景云,刘百红,刘雪微,杨欣艳,李宝春,陈西钊

(北京世纪元亨动物防疫技术有限公司,北京 100094)

猪瘟是猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,具有高传染性和高致病性的特点,严重阻碍我国养猪业的发展[1]。猪瘟被世界动物卫生组织(OIE)列为通报疫病之一,我国将其列为一类动物传染病[2-3]。猪瘟的出现距今已有200多年,目前虽然很多国家已经消灭了猪瘟,但近期,日本26年来再次暴发该病[4-5],因此它仍然是危害养猪业发展的重要传染病。目前对猪瘟的防控主要是疫苗免疫,但受各方面因素影响,猪瘟疫苗免疫失败现象时有发生,猪瘟在局部地区仍有发生与流行[6-7]。近年来,猪瘟的流行形式已从频发的大流行转变为多地区散发性流行,大多数表现为温和型猪瘟,临床症状减轻,呈现亚临床感染。母猪感染猪瘟,导致长期带毒、散毒,成为猪瘟预防免疫效果差、反复发生的重要原因。

CSFV属于黄病毒科瘟病毒属。该病毒基因组为单股正链RNA,基因组的中间部分是编码多聚蛋白的开放阅读框[8-9],从 5′→3′依次编码的结构蛋白为 Npro、C、 E0、E1、 E2 和 非结构蛋白P7、NS2、 NS3、 NS4A、NS4B、 NS5A 和 NS5B,其中 C、 E0、E1、 E2 为重要的结构蛋白,尤其是E2蛋白,是主要的保护性抗原结构蛋白,具有较强的免疫原性和反应原性[10-11],可诱导中和抗体的产生[12-14]。

目前,国内外市售猪瘟检测试剂盒较多,均为检测猪瘟抗体,用来评估猪场疫苗免疫效果。为配合猪瘟净化政策,需要研制猪瘟野毒抗体检测试剂盒。本项目利用杆状病毒表达系统表达的猪瘟野毒E2蛋白作为包被抗原,用针对猪瘟野毒的单克隆抗体经过辣根过氧化物酶(HRP)标记后作为酶标抗体建立阻断ELISA检测方法。……

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