赵少若，王孟月,白晶晶,郝丽影, 梁严予, 关洋, 邓均华*, 田克恭,*

(1. 洛阳普泰生物技术有限公司，河南 洛阳 471000；2. 国家兽用药品工程技术研究中心，河南 洛阳 471000)

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家猪、野猪的一种急性、烈性、高度接触性动物传染病，所有品种和年龄的猪均可感染，发病率和死亡率最高可达100%[1-2]。ASF于20世纪20年代在非洲地区首次被发现，具有很强的传染性，对全球家猪生产造成巨大影响。2018年我国沈阳市发生首例非洲猪瘟感染病例，并随后在全国各地陆续发生，对我国养猪业构成巨大的威胁[3-4]。

ASFV是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员，直径175～215 nm，为二十面体带囊膜的双链DNA病毒，也是唯一已知的虫媒DNA病毒。该病毒基因大小介于170～190 kb之间，包含151个开放阅读框，基因组编码150～200个蛋白[5-7]。DP96R基因在不同病毒毒株基因组中序列高度保守，属于病毒毒力基因，是导致家猪发病的重要因素之一。有研究表明DP96R蛋白属于非洲猪瘟病毒感染早期蛋白，在病毒感染巨噬细胞后2 h即可以检测到其表达，该基因缺失后，虽不影响病毒在体外巨噬细胞内的增殖，但其对家猪的致病力明显减弱[8]。本研究通过构建重组原核质粒pET28a-SUMO-DP96R并进行原核表达，对重组蛋白SUMO-DP96R进行纯化，并制备了针对DP96R蛋白的单克隆抗体，为DP96R蛋白生物学功能及ASFV基因缺失疫苗的研究提供了重要的生物材料。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级雌性BALB/c小鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.2 主要试剂

pET28a-SUMO质粒由国家兽用药品工程技术研究中心构建并保存；……