副猪嗜血杆菌血清4型和13型的分子血清分型研究
2021-02-06郭芳芳崔一芳曹晓亚徐福洲
李 忍,郭芳芳,郭 杰,崔一芳,曹晓亚,徐福洲
(北京市农林科学院畜牧兽医研究所/畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097)
副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,HPS)引起猪格拉泽氏病(Glässer's disease),感染后主要表现为多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎,在全球范围内广泛流行,给养猪业带来严重的经济损失[1-2]。目前HPS有15个血清型,不同血清型菌株之间存在高毒力、中等毒力和无毒力等显著差异,因而鉴定HPS血清型对该病的诊断和防治具有重要意义[3]。HPS血清4型、5型和13型是我国目前流行最多、分布范围最广且毒力较强的血清型[4-7],因而快速准确鉴定HPS优势流行血清型对该病原的流行病学调查和防控具有重要意义。
目前HPS常规血清型鉴定方法为在细菌分离培养和鉴定的基础上,通过琼脂扩散试验(GID)或间接血凝试验(IHA)与HPS所有单一血清型的阳性血清进行反应来判定血清型,通常需要3 d~5 d,费时费力,而且约有30%的HPS分离菌株不能被准确鉴定血清型[3,8-9],严重影响该病的临床诊断。为提高血清分型效率和准确性,近年来分子血清分型方法越来越多地应用于HPS血清分型,通过对HPS所有15个血清型荚膜多糖合成编码基因座进行结构分析和血清型特异性基因鉴定[10],建立和应用了更加准确高效的多重PCR分子血清分型方法[11-13],大大降低了不能分型的HPS临床分离株数量。
为提高临床上HPS的快速鉴定,近年来环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术用于检测HPS菌株[14-15],但尚未见LAMP用于HPS血清分型的报道,因而利用LAMP技术简便、快速、敏感、特异且易于临床应用的优点,建立HPS流行优势血清型的血清分型方法,对HPS流行病学调查和疫苗防控具有重要意义。……
