全自动免疫磁珠净化高效液相色谱法快速测定小麦中的呕吐毒素
2021-02-04邵亮亮杜京霖盛林霞应美蓉徐晨斌
邵亮亮 杜京霖 盛林霞 应美蓉 徐晨斌 章 程 李 燕
(1.浙江省粮油产品质量检验中心,杭州 310012; 2.浙江省粮食局直属粮油储备库, 杭州 311100)
小麦是世界最重要的谷物资源之一,也是我国的主要粮食作物,其质量安全关系到人们的身体健康和社会稳定。真菌毒素特别是呕吐毒素(Vomitoxin)是威胁我国小麦质量安全的主要因素之一。呕吐毒素也叫脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),是一种单端孢霉烯族毒素[1],主要来自镰刀菌属,具有细胞毒性、免疫抑制、致畸作用及可能的弱致癌性,人和动物在误食被该毒素污染的食物后会导致各类急性中毒症状[2-4]。欧盟法规规定,作为口粮的小麦,DON含量不得超过1250 μg/kg[5],我国食品安全国家标准GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》规定了小麦、麦片和小麦粉中呕吐毒素的限量均为1000 μg/kg[6],超标的小麦及其制品不能作为储备粮也不能进入市场[7]。
国内外关于呕吐毒素检测的方法主要有薄层色谱法[8]、酶联免疫吸附法[9]、胶体金免疫层析法[10]、高效液相色谱法[11]、高效液相色谱串联质谱法[12,13]等。其中薄层色谱法由于溶剂消耗量大、重现性差等原因目前很少使用,酶联免疫吸附法、胶体金免疫层析法和真菌毒素快速检测仪法一般用于快速检测和大批量样品的初筛,容易出现假阴性和假阳性结果,不能作为准确定量法使用,而高效液相色谱法和高效液相色谱串联质谱法能够精确定量,但前处理过程均需要采用免疫亲和柱净化、氮吹等前处理,过程繁琐、耗时过长。近年来,免疫磁珠富集净化法由于具有操作简便、分离快速和特异性强的优点,逐渐应用于真菌毒素检测[14-17],但目前尚未制定呕吐毒素免疫磁珠净化的行业标准或国家标准。……
