罗春萍， 陆友利，王星星(台州科技职业学院，浙江 台州 318020)

0 引言

苯酚-硫酸法是常用的测定多糖含量的方法之一[1]，该方法利用多糖在浓硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后再与苯酚缩合生成具有紫外吸收特性的有色化合物进行比色测定，具有操作简单、显色组分相对稳定、重复性好等优点[2-3]。苯酚-硫酸法多采用紫外分光光度计进行检测，由于受到比色槽数量的限制，测定多个样品时，操作较繁琐，比较费时，且实验过程中消耗较多浓硫酸并产生大量废液，对操作人员和环境易造成危害[4]。酶标仪与紫外分光光度计的测试原理相同[5]，但具有96个比色槽，可批量完成多个样品的测定，大大提高检测效率。因此，本研究以酶标仪代替紫外分光光度计为测定仪器，以葡萄糖为标准品，通过实验优化苯酚-硫酸法测定多糖的反应条件，探索多糖批量快速检测的方法。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

TU-1810紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限公司；WD-2102A全自动酶标仪 北京六一生物科技有限公司；96孔单条可拆酶标板 海门捷泰实验器材有限公司；葡萄糖、苯酚、浓硫酸均为分析纯。

1.2 实验方法

1.2.1 实验溶液的配制

(1)葡萄糖标准溶液的配制。精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准物质200mg，用蒸馏水溶解并定容至100mL，配成2.0mg/mL的葡萄糖标准品母液；然后分别移取0、1、2、3、4、5mL葡萄糖标准品母液，置于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，摇匀，即得浓度为0、20、40、60、80、100μg/mL的葡萄糖标准溶液，避光保存备用。……