徐婷婷 冯海英 朱振华

[摘要] 目的 研究观察微小核糖核酸-486-5p（miR-486-5p）对博莱霉素致肺纤维化（PF）小鼠中的作用及机制。 方法 选取健康、清洁级雄性C57BL/6小鼠40只，10只分为正常组，剩余30只建立博莱霉素致PF模型，为模型组、miR-486-5p低表达组、miR-486-5p过表达组，各10只。检测miR-486-5p表达，观察病理组织，统计肺指数、HYP含量，检测FN、α-SMA蛋白表达及TGFβ1/Smad通路相关蛋白。 结果 miR-486-5p过表达组miR-486-5p表达高于模型组、miR-486-5p低表达组（P<0.05）。miR-486-5p过表达组肺指数、HYP含量低于模型组，FN、α-SMA、TGFβ1、Smad2、Smad3蛋白表达低于模型组（P<0.05）;miR-486-5p过表达组肺指数、HYP含量以及FN、α-SMA、TGFβ1、Smad2、Smad3蛋白表达低于miR-486-5p低表达组（P<0.05）。 结论 miR-486-5p过表达调控TGFβ1/Smad信号通路对博莱霉素致PF小鼠肺纤维化有抑制作用。

[关键词] 微小核糖核酸-486-5p;博莱霉素;肺纤维化;作用机制

[中图分类号] R563.5          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2021）34-0024-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of microRNA-486-5p （miR-486-5p） on bleomycin-induced pulmonary fibrosis（PF） in mice and its underlying mechanism. Methods Forty healthy， clean-grade male C57BL/6 mice were selected， 10 of which were assigned into the normal group， and the remaining 30 were used to establish bleomycin-induced PF models and were divided into the model group， the miR-486-5p low expression group and the miR-486-5p overexpression group， with 10 mice in each group. The miR-486-5p expression was detected， and the pathological tissue was observed. In addition， the lung index and hydroxyproline （HYP） content were counted， and the expression of fibronectin （FN） and α-smooth muscle actin （α-SMA）， and transforming growth factor-β1 （TGFβ1）/Smad pathway-related proteins were detected. Results The miR-486-5p expression in the miR-486-5p overexpression group was higher than that in the model group and the miR-486-5p low expression group（P<0.05）. The lung index and HYP content in the miR-486-5p overexpression group were lower than those in the model group， and the expressions of FN， α-SMA， TGFβ1， Smad2 and Smad3 protein in the miR-486-5p overexpression group were lower than those in the model group（P<0.05）. The lung index， HYP content， and the expressions of FN， α-SMA， TGFβ1， Smad2， and Smad3 protein in the miR-486-5p overexpression group were lower than those in the miR-486-5p low expression group（P<0.05）. Conclusion The miR-486-5p overexpression plays a role of inhibiting bleomycin-induced PF in mice through regulating the TGFβ1/Smad signaling pathway.

[Key words] microRNA-486-5p; Bleomycin; Pulmonary fibrosis; Mechanism

肺纖维化（Pulmonary fibrosis，PF）属于一种慢性炎症反应疾病，患者主要表现为弥漫性肺泡炎、间质纤维化等，且近年来显示其发病率逐年增加，患者5年生存率低于50%[1]。目前临床关于PF发布机制较为复杂，主要通过糖皮质激素、免疫抑制剂等治疗，但治疗效果不理想[2]。目前，在动物研究中常常通过气管运送博莱霉素建立肺纤维化模型，模拟人特发性肺纤维化疾病，研究其发病机制[3]。已经有研究证实，在肺纤维化发病过程中，涉及到多种细胞因子、基因等复杂网络调控，微小核糖核酸（miRNAs）在肺纤维化发生中至关重要[4]。已有研究证实，在矽肺及特发性肺纤维化患者血清和肺组织中，miR-486-5p表达下调，可作为早期肺纤维化疾病标志物[5]。目前临床缺乏miR-486-5p参与肺纤维化作用机制，因此本研究旨在探讨miR-486-5p对博莱霉素致PF小鼠的作用及机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料来源

选取健康、清洁级雄性C57BL/6小鼠40只，体质量20～25 g，均由赛业（固安）生物科技有限公司提供，SYXK（冀）2021-005。鼠龄为6～8周。所有小鼠均给予常规饲养，自由饮水，黑/白光照交替12 h，温度为20～25℃，湿度为40%～50%。……