谭 杨，陈晓宇，郭 文，吴嘉颖，阿提坎·吾斯曼，曹 慧

（上海理工大学 医疗器械与食品学院，上海 200093）

抗冻蛋白（antifreeze proteins，AFPs）亦可称作冰结合蛋白（Ice binding proteins，IBPs）、冰结构蛋白（ice structuring proteins，ISPs）[1]，是一类具有提高生物抗冻能力的蛋白质类化合物的总称，不仅能够降低生物体液的冰点，抑制冰晶的形成，还能改变冰晶的生长规律，抑制重结晶[2]，因此其在动植物组织以及细胞低温保存、食物的贮藏等方面具有良好的市场前景[3-5]。到目前为止，国内外研究人员已经从植物、鱼类、陆地昆虫、细菌等各类生物体中分离出多种抗冻蛋白[6-9]。由于较低的产率及较高的成本，科研工作者仍然试图从各种资源中寻找新的AFP分子，筛选活性更强的组分。我国是畜禽生产和消费大国，由于加工技术的落后，产生了大量下脚料，研究发现，畜禽下脚料富含的胶原蛋白中具有高活性的抗冻组分[10]，可能成为AFP的主要来源之一。目前，常采用多种色谱联用技术对AFP进行不同程度的筛选，该筛选过程繁琐耗时，难以实现快速、高效筛选目的。近年来，随着对AFP功能性质研究的日益重视，已见一些利用冰晶吸附AFP的研究报道，如Kuiper等[11]通过“cold finger”吸附的冰晶分离AFP。与传统的分离方法相比冰晶特异性亲和吸附法有明显优势。不足的是，该法对抗冻组分的吸附量小，产量很低。基于此，本研究以高寒地区的牦牛骨为原料制备酶解胶原蛋白，并采用改良的可大面积吸附抗冻组分的冰亲和吸附法对其中的抗冻组分进行高效吸附，同时研究其抗冻性能。……