任 飞 张佳琦 胡恒康 梁 璧 黄有军 娄和强 张启香

(浙江农林大学林业与生物技术学院 省部共建亚热带森林培育国家重点实验室 杭州 311300)

报告基因是编码易被检测的蛋白质或酶的基因。在含有或被转入报告基因的细胞内，报告基因的表达产物可以直接产生信号或通过特定的酶促反应催化底物间接产生信号(Jawedetal., 1990)。相比于内源性生色团、化学染料和纳米探针，报告基因的编码产物具有稳定性好、特异性强及适用范围广等优点(李登峰等, 2018)。目前，在转基因植物中，使用最为广泛的为β-葡糖苷酸酶(GUS)。据不完全统计，至今已获得了上千种融合GUS报告基因的转基因植物(Honmaetal., 2019)。其优点为检测方法简单、灵敏度高，然而，由于其不能进行活体染色，组织化学染色后试验材料失去继续培养的可能，在检测植物茎秆和叶片等时会对材料造成很大的伤害和损失(李新锋等, 2016)。

荧光蛋白家族是从水螅虫纲(Hydrozoa)和珊瑚虫纲(Anthozoa)动物中分离出的一类同源性蛋白，由荧光蛋白基因编码，包括绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白等，在细胞内蛋白质的定位以及动态示踪等方面有着广泛的应用(杨宇等， 2011)。相较于其他分子标记，荧光蛋白更加易于与目的基因蛋白融合，对活细胞毒性小，应用更加便利(王文旭等, 2019)。目前应用最为广泛的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)是从维多利亚多管发光水母(Aequoreavictoria)中分离所得，由于其可以自发荧光，无需辅助因子和底物，无毒性，因此适用于监测活细胞或生物体中蛋白质的动态变化(吴瑞等， 2005)。……