一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV 的方法

2021-01-25歌孟凤珍姚艳丰

中国比较医学杂志 2020年12期

高歌孟凤珍姚艳丰∗

(1.中国科学院武汉病毒研究所,武汉国家生物安全实验室,武汉 430071;2.武汉大学基础医学院,武汉大学动物实验中心,武汉 430071)

艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)是全球三大传染病之一,自发现以来在全球迅速蔓延,对人类的生命健康造成严重威胁。世界卫生组织(World Health Organization, WHO)2020 年统计的数据显示,全球已有3800 万人感染了艾滋病病毒(human immunodeficiency virus,HIV),2019 年新增170 万病例,AIDS 导致的死亡人数高达 69万[1]。在众多HIV 相关研究的动物模型中,非人灵长类动物如恒河猴感染SIV 后出现的临床症状和发病机制与人类感染 HIV 相似[2-3]。因此,SIV 感染非人灵长类动物模型被广泛应用于HIV/AIDS 的研究,并为 WHO 所推荐[4]。抗 HIV/AIDS 的逆转录治疗的主要靶点是HIV 的逆转录酶。为了建立逆转录酶抑制剂治疗的动物模型,研究人员将SIV 的逆转录酶基因改造为HIV 的逆转录酶基因,形成基于SIV 骨架,含有HIV 逆转录酶的SIV-HIV 杂交病毒,即SHIV[5]。 SHIV 感染猴主要用于抗逆转录病毒药物耐药性的研究[5]。近年来,越来越多的研究人员将 SHIV 感染猴模型用于抗 HIV 新药的研究[6-8]。检测感染猴体内SIV/SHIV 载量的变化是评价和分析疾病发展的重要指标[9-11]。因此,建立一种快速,敏感和特异的实验方法监测SIV/SHIV载量十分必要。基于SIV/SHIV 骨架中重要且高度保守的gag基因作为目标检测对象,本研究利用TaqMan 探针技术建立了检测SIV/SHIV 病毒核酸的实时荧光定量法。