刘 君 马秀丽 薛晓鸥

1.北京中医药大学东直门医院妇科，北京 100700；2.首都医科大学附属北京中医医院妇科，北京 100700

宫颈癌是目前全球范围内威胁女性生命健康的第四大恶性肿瘤[1]。有研究显示，我国每年新发宫颈癌患者近10 万，约有3 万例患者因该病死亡[2]，发病年龄也逐步趋于年轻化。已经证实，高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈发生癌变的首要因素[3]。所以防治HPV 感染成为预防宫颈癌的重中之重，课题组的前期研究证实清热除湿凝胶有较好的HPV 转阴率，对HPV16 阳性的SiHa 细胞移植瘤的增殖有较好的抑制作用。本研究进一步观察药物对实验鼠肿瘤组织线粒体凋亡蛋白表达的影响，以求能探究药物发挥抑瘤作用的部分机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

50 只4～5 周龄雌性BALB/c 裸小鼠，体重（15±1）g，SPF 级，购自北京维通利华实验动物技术有限责任公司（SCXK 京2016-0006），饲养于北京中医药大学动物实验中心（温度：23～25℃，湿度：49%～51%）。实验经北京中医药大学医学与实验动物伦理委员会批准，批准编号：BUCM-4-2019041002-2041。

1.2 细胞

HPV16 阳性人宫颈癌SiHa 细胞株，购自中国医学科学院基础医学研究所细胞中心。

1.3 药物、主要试剂与仪器

清热除湿凝胶及凝胶中辅料卡波姆940 由百川飞虹技术有限公司生产提供。顺铂注射液（齐鲁制药有限公司，生产批号：8M0506B02），10 mg/支。上海翊圣生物科技的TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（瑞士罗氏生物公司，货号：11684817910）；重组Anti-Bax，ab2503、Anti-Bcl-2，ab182858、Anti-Caspase-9，ab202068、Anti-Caspase-3，ab184787（美国Abcam 公司）；PVDF转印膜（美国PALL，货号：XLL092-2）；ECL 化学发光试剂（美国PIERCE，货号：ECL-0012）；MEM(EBSS)培养基（中国医学科学院基础医学研究所）；胎牛血清（美国Gibco 公司，货号：10099141）、0.25%EDTA 胰蛋白酶（美国Gibco 公司，货号：25200056）。……