杨润焕 ，毕峻龙,2，赵 谦，刘 霄，杨贵树，尹革芬

(1.云南农业大学 动物医学院，云南 昆明 650201；2.楚雄州动物疫病预防控制中心，云南 楚雄 675000)

猪呼吸道疾病综合征(porcine respiratory disease complex，PRDC) 是由潜在的原发病原和继发病原，以及环境应激、不良的饲养管理和猪体免疫力降低等因素相互作用引起的疫病[1]，PRDC 是引发猪场经济损失的重要原因之一[2]，引起PRDC 的主要病原有猪伪狂犬病病毒(PRV)[2]、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)[3]、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2 型(PCV2)[4-5]、猪肺炎支原体(MH)[6]、传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)[7]和副猪嗜血杆菌(HPS)[8]等。在规模化猪场养殖过程中，PRDC 由多种病原混合感染引起，常见以病毒的、细菌的、病毒与细菌间多种组合的多重混合感染的形式出现。据临床统计，PRRSV和PCV2 混合感染较为常见[9]，对PRDC 发生起着不可忽视的影响。

为调查2016—2017 年云南省规模化猪场及散养户间PRDC 主要病原的感染状况，本研究对云南省16 个县市送检的406 份疑似PRDC 病料，通过PCR 或RT-PCR 方法进行检测，从而为有效防控地方PRDC 提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 病料信息

本研究所用样品来自云南省16 个县市送检的疑似PRDC 病料，主要采集于咳嗽、呼吸困难和体温升高等疑似PRDC 发病猪的肺、肾和淋巴结等组织病料和血液，2016 和2017 年分别送检样品113 和293 份，合计406 份。

1.2 主要试剂

RNAiso Plus Total RNA、1 000 DNA Marker、6×Loading Buffer 购自大连Takara 公司；细胞/组织基因组DNA 提取试剂盒购自北京百泰克生物技术有限公司；EasyScript RT/RI Enzyme Mix、2×ES Reaction Mix、2×TransTaqHiFiSuper MixⅡ购自北京全式金生物技术有限公司；DEPC (分析纯)、异丙醇、氯仿和无水乙醇均购自国药集团化学试剂有限公司；EasyScript RT/RI Enzyme Mix、琼脂糖购自白赛勤化学技术有限公司。……