农杆菌介导遗传转化云蔗05-51*
2021-01-22段智睿吴转娣吴才文曾千春
段智睿 ,吴转娣,姚 丽,覃 伟,吴才文,曾千春
(1.云南农业大学 农学与生物技术学院,云南 昆明 650201;2.云南省农业科学院 甘蔗研究所,云南 开远 661600)
甘蔗是主要的糖料和能源作物,蔗糖产量占世界食糖总产量的76%、占中国食糖总产量的90%以上。然而,多年来甘蔗单一品种种植引发了病虫害加剧、品种退化、抗逆性差和产量下降等问题,给蔗糖生产带来巨大的经济损失[1]。云蔗05-51 以创新种质崖城90-56 为母本,新台糖23 号为父本,于2013 年通过国家鉴定;该品种综合性状优异,具有良好的适应性、丰产稳产性,早熟高糖、抗寒抗旱性强,田间表现出苗快且整齐、分蘖力强、中大茎、有效茎多和宿根性强等特点[2]。20 世纪70 年代中期,中国开始甘蔗离体快繁工厂化生产,相关技术已经相当成熟[3]。吴转娣等[4]以云蔗05-51 茎芽为起始材料,采用MS 基本培养基添加(0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT)与增殖培养基添加(6-BA 1.0 mg/L+0.5 mg/L KT)等建立了离体快繁系统。但是以云蔗05-51 心叶作为外植体的组培再生体系及其遗传转化系统尚未见报道。
G418 是一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制转座子Tn601 和Tn5 的基因干扰核糖体功能,从而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素[5-7]。新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)是在植物转基因工程中被广泛应用的标记基因,该基因来自大肠杆菌(Escherichia coli)的aphA2基因,编码的产物氨基糖苷磷酸转移酶 [APH (3′) Ⅱ-酶]对氨基糖苷类抗生素具有抗性,将nptⅡ基因作为选择标记基因与目标基因一同导入受体植物,可赋予转基因植株对氨基糖苷类抗生素的抗性,用于植物转基因筛选[8-10]。……
