李彦荣，刘光炜，赵 晶，李亚军

(1.甘肃中医药大学(定西校区)，甘肃 定西 743000； 2.定西市人民医院 检验科，甘肃 定西 743000)

雄性动物的血清、睾丸网以及精液中都存在着一定浓度的雌激素，而以睾丸网液中的雌激素水平为高，甚至可以达到250 ng/L，雌激素对雄性生殖系统的正常发育和功能的维持也起着非常重要的作用[1]。多种因素会导致睾丸损伤，如：镉、射线、高温和氧自由基等，这些因素使睾丸Leydig细胞受到损伤，这种损伤影响到精子的生成，导致男性生殖功能障碍，男性不育症患者逐年增多[2-4]。黄芪是中国传统的中药材，始载于《神农本草经》，为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongho licus (Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根，味甘、微温、归肺和脾经[5]，具有补中益气，扶正固本之功效。黄芪中主要成分:总黄酮(Astragalus flavone)、总皂苷(Astragalus saponin)及总多糖(Astragalus polysaccharide)对睾丸Leydig细胞具有保护作用[6-9]。转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠睾丸Leydig细胞中雌、雄激素分泌均有明显抑制作用[10]。本实验探讨在黄芪中哪种成分对损伤睾丸Leydig细胞合成雌二醇(estradiol,E2)作用效果最佳。

1 材料与方法

1.1 主要材料及试剂

大鼠睾丸Leydig细胞系(北京北纳创联生物技术研究院)；胎牛血清(上海翊圣生物科技有限公司)；胰蛋白酶(YEASEN公司)；RPMI1640培养基(Hyclone公司)；TGF-β1细胞因子(Peprotech公司)；大鼠雌二醇(estradiol，E2)ELISA试剂盒、大鼠细胞色素P450芳香化酶(P450arom)ELISA试剂盒(江苏菲亚生物科技有限公司)；黄芪总黄酮、黄芪总皂苷、黄芪总多糖(北京索莱宝科技有限公司)。

1.2 实验方法

1.2.1 Leydig细胞的培养及分组处理：用RPMI1640完全培养基(90% RPMI1640基础培养基，10%胎牛血清)，在5% CO2、37 ℃培养箱中传代培养睾丸Leydig细胞。……