曹 琼，徐凝馨，李小文，吴 昊，郝建卿，覃艳红，李 莉*

(1.山西医科大学 基础医学院，山西 太原 030001； 2.山西医科大学第二临床医学院 血液科, 山西 太原 030001)

急性髓性白血病 (acute myeloid leukemia, AML)是由于髓系造血干/祖细胞发生累积性获得性基因改变, 导致细胞增殖、分化和凋亡途径发生改变的一种恶性疾病[1]。基因突变是诱发AML的重要机制之一，现已证实导致AML发生的突变主要有AML1/ETO[2]、PML-RARa[3]、MLL基因重排[4-5]等。伴随这些突变使处于正常分化的骨髓造血祖细胞分化发生停滞，细胞持续恶性增殖。近年来，针对特定基因突变而导致肿瘤发生的小分子抑制剂也逐渐用于临床，如imatinib[6]、gefitinib[7]等。

集落刺激因子-1受体(colony stimulating factor-1receptor,CSF1R)是一种Ⅲ型受体酪氨酸激酶，在巨噬细胞中表达，激活CSF1R的配体有两个：M-CSF(CSF-1)和IL-34[8]。作为受体酪氨酸激酶家族(receptor tyrosine kinases,RTK)，CSF1R磷酸化位点可作为多种激酶的停靠位点，其中包括Src家族激酶(Src family kinase，SFK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的p85亚基等[9]。CSF1R异常表达在多种肿瘤细胞的分化和增殖中起着关键作用[10]，如乳腺癌[11]、胃癌[12]和肺癌[13]。急性髓系白血病细胞系GDM-1伴有CSF1R基因突变，本研究主要通过蛋白激酶抑制方法来研究急性髓系白血病细胞系GDM-1的增殖机制，并探讨促进GDM-1增殖的主要信号通路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系：人急性髓性白血病细胞系GDM-1、人单核巨噬细胞系THP-1(ATCC公司)；细胞培养所用培养基含有10%的胎牛血清的RPMI Medium 1640，细胞培养于37 ℃、5% CO2的培养箱中。

1.1.2 主要试剂：蛋白激酶抑制剂(protein kinase inhibitors，PKIs)见表1(Selleckchem公司)；将抑制剂粉末溶于DMSO，配置浓度为20 mmol/L的储备液-80 ℃保存。细胞培养基RPMI Medium 1640(Hyclone公司)；胎牛血清(赛澳美细胞技术有限公司)；……