张天瑞，高文怡，姚 娟

(1.新疆医科大学， 新疆 乌鲁木齐 830000； 2.新疆医科大学第一附属医院 影像中心,新疆 乌鲁木齐 830000)

乳腺癌(breast cancer)是全世界女性最常见的恶性肿瘤[1]。迄今为止乳腺癌的发生发展及病因和发病机制尚不全明确。随着基因组学、蛋白组学和生物信息学等技术的发展和应用,在研究乳腺癌基础中的一些热点领域值得重视。

赖氨酸去甲基化酶3A (lysine demethylase 3A, KDM3A)是组蛋白脱甲基化酶家族的一个成员,能特异性地脱甲基化组蛋白H3 Lys-9,因此在组蛋白编码中起着中心作用[2-3]。KDM3A可以促进前列腺癌[4-5]、肝癌[6]的进展。目前,国内外研究[8]仅发现KDM3A 通过去甲基化组蛋白和非组蛋白p53在乳腺癌细胞侵袭和凋亡中起到双重作用,但其在乳腺癌中发生发展的具体机制还有待进一步探讨。本项目组前期实验证明组蛋白去甲基化酶KDM3A在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织,组蛋白去甲基化酶KDM3A的表达水平与乳腺癌细胞的侵袭能力呈正相关,本研究分析KDM3A基因对乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和凋亡的影响,旨在为乳腺癌靶向治疗提供一定的理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

乳腺上皮细胞系MCF-10A及乳腺癌细胞系MDA-MB-231(北京北纳创联生物技术研究院)；PBS磷酸盐缓冲液粉剂(福州迈新生物技术开发有限公司)；胎牛血清(Life Technologies公司);Trizol® Reagen(Invitrogen公司);M-MLV和dNTPs(Promega公司);Bulge-LoopTMmiRNA和qPCR Primer Set(广州锐博生物技术有限公司);DMEM-H培养基、0.25%胰蛋白酶及青霉素-链霉素双抗(10 000 U)(Gibco公司);CCK8试剂(北京全式金生物技术有限公司);阴性对照病毒CON077和LV-KDM3A-RNAi慢病毒(上海吉凯基因科技有限公司);Transwell小室(Corning公司);DMSO(Sigma-Aldrich公司)。……