谢 飞，周美兰

(1.武警陕西省总队医院 内一科， 陕西 西安 710054； 2.空军军医大学第一附属医院 肾脏内科， 陕西 西安 710032)

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病患者常见的合并症之一，也是目前引起终末期肾病的重要原因[1]；足细胞是肾小球过滤屏障的重要组成部分，在维持肾小球滤过膜正常通透性方面发挥着重要作用，其损伤与DN发生发展密切相关，而改善足细胞损伤可减缓或阻止DN发展[2]。羟基红花黄色素A(hydroxysafflower yellow A，HYSA)是从中药红花中提取的一种具有单查尔酮苷类结构的化合物，是红花黄色素的主要药理活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化和抗感染等多种药理活性[3]。研究[4]显示，HYSA可通过减少高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡和活性氧的生成等发挥保护糖尿病血管损伤的作用。有研究[5]指出，HYSA具有保护慢性肾病肾脏功能的作用，但其对DN的影响并不完全清楚。本研究通过观察HYSA对高糖诱导的足细胞损伤的影响及其机制，旨在揭示HYSA是否具有保护足细胞损伤的作用，为DN的治疗提供新线索。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞： 小鼠肾足细胞系MPC5(上海斯信生物公司)。

1.1.2 试剂及试剂盒： γ干扰素(Protech公司)；HSYA标准品(纯度≥98%，上海源叶生物科技公司)；RPMI1640培养基、0.25%胰蛋白酶和胎牛血清(Gibco公司)；BCA蛋白定量试剂盒和全蛋白提取试剂盒(北京索莱宝生物技术公司)；MDA、SOD和GSH-PX检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；CCK-8试剂盒(日本同仁化学研究所)；Anexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(上海贝博生物科技有限公司)；caspase-3活性检测试剂盒(Cell Signal Technology公司)；Nephrin、α-SMA、fibronectin、JNK和p-JNK抗体(Santa Cruz Biotechnology公司);GAPDH、VEGF抗体(Abcam公司);辣根过氧化酶标记的IgG二抗(北京中杉金桥生物公司)。……