许瀚元，朱惠娟，潘 慧，阳洪波，王林杰，龚凤英

(中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院 内分泌科 国家卫生健康委员会内分泌重点实验室， 北京 100730)

脂联素(adiponectin)是一种主要由脂肪细胞分泌的脂肪细胞因子，主要作用于肝脏和脂肪组织，发挥调节脂代谢、增加胰岛素敏感性、抗感染等的作用[1]。研究发现，肥胖患者的血清脂联素水平降低[2]。脂联素过表达能使高脂饮食喂养的小鼠肝脏中三酰甘油含量下降，内脏脂肪组织减少[3]。进一步研究表明，脂联素能够通过调节脂肪合成与分解相关酶表达参与脂代谢的调节[4]。

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase，FAS)与激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase, HSL)分别是在脂肪合成与分解过程中的关键限速酶[5]。研究报道，脂联素受体激动剂能够抑制C3H10T1/2小鼠间充质干细胞中FAS的表达[6]，而脂联素干预原代培养的脂肪细胞能够使细胞中HSL mRNA的表达量上升[7]。但关于脂联素对人肝细胞中FAS与HSL表达的影响目前尚无相关的文献报道。

本研究旨在通过构建含人FAS与HSL启动子的荧光素酶表达质粒，探究脂联素对人肝癌细胞系(human hepatocarcinoma cell line)HepG2细胞中FAS及HSL启动子活性的影响，为进一步揭示脂联素调节肝细胞脂代谢的作用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料

DMEM/NEAA培养基(Hyclone公司)；Opti-MEM减血清培养基(Gibco公司)；LipofactamineTM2000转染试剂(Invitrogen公司);微孔板发光分析仪(北京滨松光子技术有限公司，BHP9504);人血DNA提取试剂盒(Omega公司);双荧光素酶测定试剂盒、pGL3-Basic质粒、pRL-SV40质粒及pBS-T质粒(Promega公司);人肝癌细胞系HepG2(中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心);重组人球形脂联素(Peprotech 公司);DNA测序由上海生工生物科技公司完成。……