杨晓辉,贾晓强

(天津大学 化工学院 系统生物工程教育部重点实验室，天津 300354)

脂肪酸是由烃链和羧基组成的有机化合物，多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid，PUFA)是其中的一类[1]。多不饱和脂肪酸中的二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA，C22∶6)在预防心血管疾病、炎症、自身免疫性疾病等方面发挥着重要作用[2]。以往获取DHA的传统来源是深海鱼油[3]，然而，这些来源的DHA具有鱼腥味重、稳定性差的问题[4]。研究表明，海洋鱼类中DHA的积累主要来源于微藻，因此，可以开发利用生产DHA的微藻的技术来实现DHA的微生物生产[5]。

海洋微生物细胞中含有大量的DHA，且被认为是生产这种重要脂肪酸的潜在微生物来源。异养非光合微藻——寇氏隐甲藻(Cryptheccodiniumcohnii)可积累较高比例的脂质(约为细胞干重的40%)和高质量的DHA，近年来备受关注[6-8]，且因其产生的脂质中，其他多不饱和脂肪酸(PUFA)的含量相对于DHA的含量来说非常少，故非常有利于后期DHA的纯化。但与许多其他微藻一样，脂质积累效率和生物量是阻碍其工业化生产的两个限制因素[9]。

为了解决这些问题，已有多种方法被报道，包括诱变育种[10]、发酵条件的优化[11-12]，寻找最适氮源等[13-14]。但在这些努力下，隐甲藻的脂质产量依旧低于其他的产油微生物[15-16]。与此同时，利用基因工程方法提高藻类微生物的脂质含量及生物量也被广泛研究，又因为缺乏全基因组序列信息，限制了这种方法的深入应用。因此，研发DHA生产水平较高的工程藻株，探索高产DHA的发酵技术具有重要的经济意义。

1 隐甲藻概况及其DHA的合成途径

寇氏隐甲藻(C.cohnii)是有鞭毛的异养海生甲藻，形态多样，一般为单细胞。……