王菊英， 苏 明

（宁夏医科大学总医院医学实验中心，银川 750004）

根据检验目的和要求的不同，人类免疫缺陷病毒（HIV）检测方法有抗原抗体检测、病毒分离培养检测、病毒核酸定性定量、病毒基因分型、病毒耐药检测等[1]。在这些检测技术中，抗体检测是应用时间最长、方法成熟、操作简便、特异性和敏感性均较高的一类检测方法，被广泛应用于HIV感染的筛查和确认工作中[2]。我国HIV 抗体筛查实行先初筛、复检再确证的策略。有报道[3]表明，我国HIV 抗体检测试剂诊断效能存在一定的差异。WHO 调查数据表明[4]，155 个国家执行100%的HIV 筛查，仅71 个国家使用质量有保证的HIV筛查方法。本研究以免疫印迹实验（WB）为金标准，分析评价了化学发光法（CLIA）、胶体金及酶联免疫吸附实验（ELISA）检测HIV 抗体的准确性，结合各自方法学的特点，确立并验证了本室HIV 抗体初筛、复检及确证等筛查策略的可行性，为避免因试剂敏感性差异导致漏送，针对经复检验证无须做确证实验的样本，其检测报告中添加备注，汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

131例研究对象来自宁夏医科大学总医院2018年5—11月的门诊及住院患者，其中男性79例，女性52例，年龄1～77 岁，平均年龄（42.49±18.3）岁。

1.2 仪器与试剂

HIV 抗体CLIA 检测使用奥森多VITROS3600全自动免疫分析仪及其配套试剂；胶体金试剂由英科新创（厦门）科技有限公司提供；ELISA 试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供。

1.3 方法

将131例采用CLIA 初筛的HIV 抗体有反应血清样本，采用CLIA 法、胶体金及ELISA 复检，同时将所有样本送宁夏回族自治区疾病预防控制中心（CDC）WB 确证。检测和送检程序及质量保证措施严格执行科室相关文件。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0 软件对数据进行统计分析。CLIA 检测95%阳性预测S/CO 值采用受试者工作特征曲线（ROC）确立，样本率比较采用χ2检验，均数比较采用独立样本t 检验，P≤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CLIA 检测HIV 抗体的准确性

131例CLIA 初筛有反应血清样本，经CLIA复检符合率为100%（131/131）；经WB 确认阳性55例、阴性73例、不确定3例；排除3例不确定结果，其检测敏感性为100%（55/55）；128例经WB 明确确证病例结果经ROC 确立，其95%阳性预测S/CO 值为7.0025，曲线下面积（AUC）=0.999，标准误差（SD）=0.997，P＜0.001。

2.2 胶体金及ELISA 的准确性

128例经WB 明确确证病例中，胶体金检测55例阳性、61例阴性，敏感度100%（55/55）、特异性91.78%（67/73）；ELISA 检测60例阳性、68例阴性，敏感度98.18%（54/55）、特异度93.15%（68/73）；胶体金与ELISA 敏感度差异无统计学意义（χ2=1.01，P=0.32）、特异度差异无统计学意义（χ2=0.10，P=0.75）；63例胶体金及ELISA 同时阴性者WB 均为阴性。

2.3 CLIA

HIV 抗体检测结果的S/CO 值与WB、胶体金及ELISA 一致性比较，本研究54例WB、胶体金及ELISA 均阳性者CLIA 的S/CO 值均＞7.0025，54例均阳性者S/CO 值高于63例均阴性者和11例不一致模式者（P均＜0.01），见表1。

表1 CLIA HIV 抗体检测结果S/CO 值与WB、胶体金及ELISA 一致性的比较

3 讨论

在检测病原体时，应首先进行筛查实验或诊断实验。通常应选择灵敏度高的试剂，以最大可能地提高检出率，避免漏检[5]。本室应用的CLIA、胶体金及ELISA 等HIV 抗体筛查实验均为定性实验。依据《临床定性免疫检验重要常规项目分析质量要求》，筛查定性实验的检测敏感性应＞95%[6]。本研究CLIA、胶体金及ELISA 的敏感性分别为100%（55/55）、100%（55/55）、98.21%（54/55），都满足筛查实验要求，均可用于HIV 抗体筛查。段美婷等[7]研究发现，CLIA 法检测HIV 早期感染阳性率及敏感性均高于ELISA，与本研究CLIA 敏感性与ELISA 相一致。师毅等[8]研究证实，胶体金检测HIV 的敏感度低于CLIA 等方法，与本研究两者的敏感性一致有出入，可能与本研究纳入样本量有限相关。由此看来，CLIA 检测HIV 抗体的敏感性高于胶体金和ELISA。另外，与胶体金及ELISA 相比，CLIA 在自动化分析仪上完成，具有高通量、操作简便、易于标准化等优点，更适宜作HIV 抗体初筛。由于窗口期的存在，不可避免出现窗口期漏检的情况[9-12]，此种情况实验室无法知晓，但临床医生可根据对患者自述高危行为来评估，实验室得知后应建议窗口期过后复检。

2015年版《全国艾滋病检测技术规范》中对HIV 抗体初筛有反应的样品复检的规定，“对初筛有反应的样本，用原有试剂双份或双孔进行复检实验（或者两种试剂复检）”。本研究131例CLIA 有反应样本复检符合率为100%，如果依据技术规范采用CLIA 双份复检，一阴一阳或两阳均做确证实验，那么131例均应送CDC。本研究63例胶体金及ELISA 复检均阴性者，经WB 确证亦皆为阴性。依据技术规范，如果复检两次检测均阴性报告为“HIV 抗体阴性”，由此看来这63例阴性样本就不用送检。由于CDC 确证实验报告周期为1周，而艾滋病至今仍与歧视相关联，患者一旦被冠以艾滋病相关的诊断都会对其造成极大的心理负担[13-14]。文献报道[15]及本研究都证实了，通过胶体金及ELISA 两种试剂复检，有利于降低初筛假阳性率，提高HIV 感染的检出率，减少对临床诊疗的困扰。

本文ROC 曲线结果显示，CLIA 检测HIV 抗体95%阳性预测S/CO 值为7.0025，54例WB、胶体金及ELISA 均阳性者CLIA 的S/CO 值均＞7.0025，54例均阳性者S/CO 值高于63例均阴性者和11例不一致模式者。由此说明，HIV 抗体CLIA 结果S/CO 值＞7.0025 且两种复检结果均为有反应者，预示HIV 感染的可能性＞95%。由于确证实验报告滞后，遇到此类病例要尽快告知临床加强个人防护，注意消毒。鉴于纳入研究的样本量有限，为了防止因复检试剂敏感性低造成漏送，本室将胶体金及ELISA 复检均阴性，S/CO 值在1～7.0025 的CLIA 有反应样本，采取了报告“HIV抗体阴性”、添加备注“建议一月后复检”，并将此类患者信息做了详细记录，以便追踪验证。在后续的工作中发现有6例经追踪监测能转为阴性，不过，也发现2例孕妇1 个月后复检CLIA S/CO值均升高，且胶体金复检有1例出现了弱阳性，但CDC 的确证结果均为阴性。文献报道[16-17]，HIV抗体初筛检测假阳性还与恶性肿瘤、心血管病、透析、自身免疫性肝病、妊娠等有关，本研究转阴病例中4例为肿瘤患者、2例为心血管病，与之相符。这些疾病可使患者体内含有某些治疗性抗体，类脂异嗜性抗体、类风湿因子等。这些物质与试剂中的抗原成分非特异性结合，从而出现假阳性。因此，通过追踪监测分析总结HIV 抗体筛查实验出现假阳性的原因，在遇到CLIA S/CO 值在1～7.0025 时，能结合临床诊断及复检结果作出初步判断，以便与临床更加有效沟通。

综上，本室确立的HIV 抗体初筛采用CLIA，有反应样本采用胶体金及ELISA 复检，复检后有反应样本送CDC 确证；经复检验证无须做确证实验的CLIA 有反应样本，其检测报告中添加备注。此检测及报告策略适用于HIV 临床筛查。