刘颖沙，何新全，李建科，刘颖楠，李冰花，王 迪

(1.杨凌职业技术学院生物工程学院，陕西 杨凌712100； 2.汉中市勉县勉阳街道办事处，陕西 勉县724200； 3.陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西 西安710119)

0 引言

胶体金标记技术目前越来越广泛地应用于免疫诊断等相关领域[1]。1971年，FAULK W P等[2]成功制备金标抗体(兔抗+胶体金)。BERGER E等[3]建立胶体金免疫层析法(GICA法)。胶体金免疫层析技术在临床医学、环境检测和农产品质量安全等领域有着广泛应用。本文围绕胶体金制备技术、标记技术进行优化，并探讨其在农业生产及农产品安全检测领域的应用。

1 胶体金制备技术优化

胶体金的制备方法，公认采用还原HAuCl4法[4]。氯金酸溶液在如柠檬酸三钠等类似相关还原剂的结合下，聚集为一定大小的颗粒物质，从而达到牢固状态。直径3～30 nm的胶体金可作为免疫标记探针，便于后续标记试验。

目前胶体金制备方法主要有柠檬酸三钠法、抗坏血酸法和柠檬酸三钠-鞣酸法。其中柠檬酸三钠法是制备胶体金的最佳方法，以0.01%氯金酸+2 mL 1%柠檬酸钠为最佳配比，以呈现酒红色为最佳颜色判定，以20 nm为最适标记粒径。但是此方法制备胶体金保存时间较短，为延长胶体金保存时间，可采取以下措施。

1.10.22 μm过滤操作

在胶体金的烧制过程，每一个步骤均将胶体金采用0.22 μm滤膜过滤[5]。未经0.22 μm滤膜过滤和经过0.22 μm滤膜过滤的胶体金溶液全波长扫描图和540 nm左右处放大图如图1～2所示。由图1可以看出，未过滤的胶体金溶液在540 nm附近出现突然上升趋势，随后下降等多处凸起趋势，曲线较粗糙，不够平滑，可能由于在此波长下胶体金颗粒大小不均 一或颜色不均匀造成。……