肝癌细胞HepG2外泌体对其自身生长行为的影响及其机制研究*
2021-01-13王一涵王奕丹黄钰雯刘丽梅
阴 迪,王一涵,王奕丹,黄钰雯,刘丽梅,夏 薇
北华大学医学技术学院,吉林吉林 132013
肝癌的发生、转移与肿瘤微环境密切相关。有研究表明,肿瘤细胞可以通过细胞与细胞间的直接接触或者旁分泌的方式影响肿瘤微环境,从而促进肿瘤的形成与发展[1-2],然而其自身生长调节方式与行为改变模式还不清晰。外泌体是细胞分泌的一类30~100 nm的微小囊泡状结构,内含蛋白成分与核酸成分,已有研究表明,外泌体参与细胞通讯,是细胞间沟通的重要媒介[3]。因此,本研究推测肿瘤细胞的外泌体对肿瘤细胞会存在某种影响。为进一步验证该推测,本研究从细胞实验、核酸分析等角度,探讨了肝癌细胞HepG2外泌体对其自身细胞的增殖、迁移、周期及相关基因转录水平的影响。
1 资料与方法
1.1仪器与试剂 肝癌细胞HepG2购自上海中科院细胞库;DMEM培养基购自美国Gibco公司;胎牛血清购自美国Hyclone公司;CD63抗体、CD9抗体均购自美国Abcam公司;HRP-羊抗兔免疫球蛋白(Ig)G、HRP-羊抗鼠IgG、超敏ECL化学发光即用型底物均购自美国Boster公司;Transwell细胞板购自美国Corning公司;DiI红色荧光探针购自中国碧云天公司;碘化丙啶试剂购自德国BioFroxx公司;RNA提取与反转录试剂盒、SYBR Green试剂均购自日本Takara公司;实时荧光定量PCR(qPCR)仪、超速离心机均购自美国Thermo公司;透射电子显微镜购自日本Hitachi公司;纳米粒度仪购自美国Microtrac公司;垂直板电泳系统购自美国Bio-Rad公司。
1.2方法
高压氧治疗可有效提高血氧含量和血氧弥散半径,提高脑组织细胞氧供应和利用,维持脑神经细胞的能量供应,增加对病灶区的供血,使受压萎缩的脑组织血流量增加、脑回体积增大[12],同时高压氧治疗具有清除自由基作用、减少缺血区脑组织的凋亡,促进脑组织复张;……
