连秋燕，朱峰，施点望，林丽云，邱尚仁

[1.国家纺织服装产品质量监督检验中心（福建），福建 福州 350026；2.福建省纺织产品检测技术重点实验室，福建 福州 350026]

3-亚苄基樟脑（3-BC，CAS：15087-24-8）和4-甲基亚苄基樟脑（4-MBC，CAS：36861-47-9）等樟脑衍生物类化合物具有六环结构，通常有很高的紫外线吸收效率，具有强UVA段吸收，被添加到纺织品[1]、塑料、化妆品、护发品等工业产品，也用作涂料、颜料、涂层等的光稳定剂，以延缓产品老化[2-3]。纺织品经抗紫外整理后，可以减少织物泛黄或变脆的现象，而且可以保护人体皮肤少受紫外线的伤害，因此，在抗紫外织物的市场日益扩大的情况下上述物质被大量使用[4]。

研究表明，3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑具有胚胎毒性，存在内分泌干扰特性，对人体有长期且不可逆的影响[5-6]。来自德国提交给欧盟的技术报告显示：4-甲基亚苄基樟脑和3-苯亚甲基樟脑的雌性激素干扰模式类似于对特辛基苯酚（CAS：140-66-9）。

2007年，我国《化妆品卫生规范》将3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑列为限用防晒剂，限定了其加入量。国际上对化妆品中防晒剂的使用量和种类有严格的管理和限制[7-8]，2016年2月29日，欧洲化学品管理局（ECHA）将4-甲基亚苄基樟脑、3-苯亚甲基樟脑等4种物质列入高关注物质（SVHC）咨询清单，对其提起公众咨询。2018年12月18日，欧盟在其官方公报（OJ）上公布了一项决议（E U）2018/2013，正式将3-亚苄基樟脑确认为高度关注物质（SVHC）。

对3-亚苄基樟脑（3-BC）和4-甲基亚苄基樟脑（4-MBC）检测的研究主要是在化妆品中防晒剂的测定[9-12]，因为目前为止，国内外还未发现纺织品中3-BC和4-MBC检测方法的相关研究报道，因此，开展此项研究具有重大的意义。

本文建立了纺织品中3-BC和4-MBC的（LCMS/MS）分析方法[13]。该方法采用超声萃取，高效液相色谱分离，串联质谱电喷雾离子源（ESI）电离，正离子多反应监测模式（MRM）进行定性和定量。方法具有简单、快速、灵敏、准确的特点，用于纺织样品中3-BC和4-MBC的检测分析，为严格质量管理监控提供必要的技术支持。2种樟脑衍生物的化学信息见表2。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

1290 Infinity高效液相色谱-6410B串联质谱仪：配有2级质量分析检测（HPLC-MS/MS），美国Agilent公司；97043-942超声波发生器，美国VWR公司；提取器：具密封塞提取瓶；1 mL一次性注射器；0.22 μm尼龙过滤头。

甲醇、乙腈、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮均为色谱纯。

甲酸铵，纯度≥98.0%（德国CNW科技公司）； 标准品：3-亚苄基樟脑（3-BC）纯度为 99.6%、4-甲基亚苄基樟脑（4-MBC）：纯度为97%（德国CNW科技公司）。

1.2 标准溶液的配制

精密称取标准品3-BC和4-MBC，用甲醇配制的标准储备液（1000 mg/L），0～4 ℃保存。根据需要逐级稀释至相应浓度。

1.3 样品前处理

称取1.0 g已剪碎混匀的试样（精确至0.001 g），置于具密封塞提取瓶中，加入10 mL乙腈溶液，超声波50 ℃中超声振荡30 min。过0.22 μm滤膜，滤液用HPLC-MS/MS检测。

1.4 色谱和质谱条件

1.4.1 HPLC条件

色谱柱：美国Agilent公司ZORBAX SB C18柱（2.1 mm×150 mm，3.5 μm；）；柱温：35 ℃；流动相A：甲醇；流动相B：0.01 mol/L甲酸胺水溶液。

梯度洗脱条件：0～2 min，85% A～90% A；2～3.5 min，90% A～100% A；3.5～5 min，100% A；5～6 min，100% A～85 % A；6～8 min，85% A。

进样体积：5.0 μL；流速：0.2 mL/min。

表1 2种樟脑衍生物的化学信息

表2 2种化合物的多反应监测质谱参数和保留时间

1.4.2 MS/MS条件

检测方式：多反应监测（MRM）模式；正离子扫描；离子源温度：350 ℃；电喷雾电压：4000 V；雾化气压力：300 kPa；干燥气流速：12 L/min。其他参数如表2所示。

2 结果与讨论

2.1 色谱柱的优化

3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑结构相似，分子量接近，要使他们在色谱上实现分离，色谱柱的选择是关键。因此实验考察了不同型号规格，不同长度的5种色谱柱对3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑分离效果，实验结果表明：Zorbax SB-C18柱（2.1 mm×150 mm，3.5 μm）可以实现2个化合物的有效分离。

2.2 流动相的优化

实验对甲醇-水溶液和乙腈-水溶液进行比较分析。发现：2个体系对2个化合物的分离效果差异不大，于是选择了2个化合物响应值较高的甲醇体系，且考察了在水相中添加0.1 %甲酸、0.01 mol/L甲酸铵、0.01 mol/L乙酸铵对2个化合物分离的影响，结果表明用0.01 mol/L甲酸铵水溶液为流动相时，2个化合物的分离度更好、灵敏度更高，因此选择甲醇-0.01 mol/L甲酸铵水溶液为流动相。

图1 2种化合物的MRM图。

实验对流动相梯度洗脱条件、色谱柱温和流动相流速进行了优化，结果如1.4.1中的HPLC条件，使得2种化合物实现基线分离，获得较高的响应值。

2.3 质谱条件的优化

分别用正、负离子扫描3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑，结果表明：3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑在正离子扫描模式分子峰较明显，在负离子模式下质谱响应很弱，此选择正离子扫描模式。实验进一步优化了母离子和子离子，对质谱条件进行了优化选择，确定最佳的质谱参数如1.4.2所列。最佳质谱条件下，得出的2个化合物的MRM图如图1所示。

2.4 前处理方法的优化

实验采用超声波提取方法，比较了乙腈、甲醇、乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷对3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑的提取效率，结果如图2所示，乙腈对2种化合物的提取效率最高。实验选择乙腈作为提取溶剂，并进一步考察了提取溶剂体积对提取效率的影响，同时优化了超声温度，超声时间，得出最佳的前处理实验条件如1.3所列。

2.5 方法的线性关系和检出限

图 2 提取溶剂对2种化合物提取效率的影响（n=3）

配置一定浓度范围的3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑标准溶液，在优化的实验条件下进行测定，以化合物的质量浓度（c，μg/L ）为横坐标，以化合物在MRM模式下定量离子的峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到线性回归方程和相关系数（R2）；分别按信噪比（S/N =3）和S/N =10时的质量浓度确定方法的检出限（LOD）和定量限（LOQ），结果如表3。

表3 2个化合物的线性方程、检出限和测定低限

表4 方法的回收率和相对标准偏差（n=6）

2.6 回收率与精密度

实验选取了棉、腈纶、粘纤等阴性样品，在最佳前处理条件下，进行6次的加标回收率实验，实验添加的分别是测定低限、2倍测定低限、10倍测定低限3个浓度水平的目标化合物。

在优化的色谱条件下测定。实验结果（表4）：3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑的平均回收率为78.2%～100.3%，相对标准偏差为4.3%～9.8%，说明该方法的重现性好，精密度高，能满足纺织品中2种樟脑类衍生化合物紫外吸收剂的测定要求。

3 结论

利用高效液相色谱-串联质谱建立了纺织品中3-亚苄基樟脑和4-甲基亚苄基樟脑2种樟脑类衍生化合物的检测方法，通过优化提取溶剂等前处理条件和质谱检测条件，在短时间内实现2种化合物的有效分离，该方法简便、快速、灵敏、准确，适用于纺织品中2种樟脑衍生类化合物的测定，为严格质量管理监控提供必要的技术支持。