张洪

摘要：目的：分析抗苗勒氏管激素（AMH）預测卵巢储备功能及卵巢反应性的效果。方法：本文随机抽取我院于2016年4月-2017年8月收治的93例不孕症患者为研究对象。其中，42例患者接受IVF-ET治疗。将患者的获卵数（5个）作为分组依据，将>5个患者纳入正常组，将≤5个的患者纳入卵巢低反应组。采集患者静脉全血标本，分离获得血清检测其AMH，并利用RT-PCR对患者的AMH mRNA进行检测。结果：患者bAMH与初潮年龄、年龄呈负相关关系，与窦卵泡数呈正相关关系（P<0.05）;IVF-ET患者卵巢反应性与AMH mRNA、AMH有关（P<0.05）;AMH mRNA与受精卵数存在相关关系，bAMH与获卵数呈正相关（P<0.05）。结论：AMH用于卵巢储备功能及卵巢反应性预测，效果较好。

关键词：抗苗勒氏管激素;卵巢储备功能;卵巢反应性

【中图分类号】 R711    【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2021）17--01

前言：目前临床上预测女性卵巢储备功能、卵巢反应性的指标数量较多。其中，AMH作为一种糖蛋白二聚体，其主要产生于女性患者的卵巢颗粒细胞及小卵泡中[1]。本文将93例不孕症患者为研究对象，对AMH预测卵巢储备功能及反应性的效果进行分析：

1资料与方法

1.1一般资料

本文随机抽取我院于2016年4月-2017年8月收治的93例不孕症患者为研究对象。患者年龄26-37岁，平均年龄（32.1±4.2）岁;初潮年龄13-16岁，平均初潮年龄（14.9±1.0）岁。所有患者排卵功能及月经周期均正常，且12w内均未接受促排卵治疗。所有患者中，42例患者接受IVF-ET治疗。将患者的获卵数（5个）作为分组依据，将>5个患者纳入正常组，将≤5个的患者纳入卵巢低反应组。

1.2方法

1.2.1标本收集方法

①血清标本收集方法。于患者月经周期第3d清晨，采集患者3mL静脉全血;IVF-ET患者，分别于其hCG注射、IVF周期Gn注射以及取卵当日清晨，采集空腹患者3mL静脉全血。与采集血清标本2h内进行离心处理，获取患者血清，并将其置入三个0.5mLEP管中。②卵泡液收集方法。IVF-ET患者行长方案超促排卵，当患者直径高于16mm的卵泡数量超出3个时，肌内注射10000IUhCG，等待36h后，去乱兵选出最大卵泡细胞液，置于-80℃冰箱内保存，以备后续检查。③颗粒细胞分离方法。于光学显微镜下，将卵母细胞周围颗粒细胞团剥离下来，并置于卵泡液中，持续离心10min，于50%Percoll液中加入离心所得沉淀，仍然按照上述条件进行离心，以去除细胞团中的红细胞。将界面处的颗粒细胞层吸出，将其置于0.2g/L胶原酶I型（2倍体积）进行消化处理。取细胞悬液置入50%Percoll液（等量）中离心，以M199培养基洗涤后，运用台盼蓝染色法确定，此时细胞存活率高于75%。经纯化细胞种于24孔培养板中，于CO25%、37℃环境孵箱内培养。

1.2.2卵泡液、血清AMH蛋白检验方法

以37℃恒温箱融化患者的卵泡液标本及血清标本。向孔内加入待测样本、20μl标准品及质控样本，并按照100μl/孔分别加入缓冲液。经振荡（每分钟550-700r）处理后，于室温条件下持续孵育1h。按照每次0.5min，持续5次的方式运用洗液进行洗板。分别于每孔内混入100μl抗体生物素结合物，按上述条件振荡并孵育。重复5次洗板。将混入物更换为酶结合溶液，重复振荡、孵育及洗板。行RT-PCR。用于卵巢颗粒细胞AMH mRNA的检测。

1.3观察指标

观察不孕症患者的一般状况。

观察IVF-ET患者的AMH相关性。

观察不同卵巢反应患者的AMH差异。

观察患者AMH与受精卵数、获卵数的相关性。

1.4统计学方法

通过SPSS24.0软件对不孕症患者的数据进行统计。认为患者差异有统计学意义的标准为：P<0.05。

2结果

2.1不孕症患者的一般状况

93例不孕症患者中，窦卵泡数（AFC）3-13个，平均（8.2±4.1）个;早卵泡期血清AMH蛋白水平0.2-5.1ng/mL，平均血清AMH水平（1.94±1.37）ng/mL。患者的bAMH与初潮年龄、年龄呈负相关关系（P<0.05）;bAMH水平与AFC呈正相关关系（P<0.05）。

2.2IVF-ET患者的AMH相关性

AMH mRNA相对含量与bAMH、FFAMH呈正相关关系（P<0.05），结果如表1所示。

2.3不同卵巢反应患者的AMH差异

42例IVF-ET患者中，正常组28例，低反应组10例（另外4例为过反应）。两组患者的bAMH水平、AMH mRNA、FFAMH水平差异均有统计学意义（P<0.05）。

2.4AMH与受精卵数、获卵数的相关性

患者基础血清AMH水平与获卵数呈正相关关系，患者卵巢颗粒细胞AMH mRNA表达、卵泡液AMH水平与受精卵数之间存在相关性。

3讨论

3.1AMH

作为一种糖蛋白二聚物，AMH仅于性腺中表达。高珊[2]等在研究中证实，在卵巢储备功能及卵巢反应性预测中，AMH的预测价值良好。

3.2AMH在卵巢储备功能、卵巢反应性预测中的应用

上述研究表明，月经周期规律的女性，其血清AMH水平表达稳定，女性患者bAMH水平与获卵数之间呈正相关关系。卵巢反应性与患者AMH mRNA及AMH存在关联，卵巢反应正常患者与低反应组患者间的差异有统计学意义（P<0.05）。

结论：医院可于卵巢储备功能及反应性预测中推行AMH预测。

参考文献：

[1]何艺磊，李蓉，乔杰. 抗苗勒氏管激素与卵巢储备及反应性相关研究进展[J]. 生殖与避孕，2016，36（08）：653-659.

[2]高姗，赵冬妮，谭季春. 抗苗勒氏管激素评估卵巢储备功能的临床应用现状[J]. 生殖与避孕，2016，36（08）：648-652.