段春艳 王以云 王秀艳 胡文红

摘要：目的：探讨艾曲泊帕乙醇胺最合适的微生限度检查的方法。方法：采用2020版《中国药典》<1105非无菌产品微生物限度检查法>中的微生物计数法中的薄膜过滤法和平皿法相结合的方法进行验证。结果：在验证条件下，该方法能消除供试品对微生物生长的抑制作用。结论：该方法准确可靠，可用于艾曲泊帕乙醇胺的微生物计数法的检测。

关键词：微生物计数法;艾曲泊帕乙醇胺;方法验证

中图分类号： 文献标识码：A

艾曲波帕乙醇胺可用于治疗经糖皮质激素类药物、免疫球蛋白治疗无效或脾切除术后慢性特发性血小板减少性紫（ITP）患者的血小板减少。该药作为ITP二线治疗的优选方案，不仅可快速提升血小板数量，便利的口服方式改变了过去以注射为主的治疗方式，提升了患者的用药依从性。

1 材料

（1）仪器与设备 六联支架过滤装置（赛多利斯），无菌滤膜（赛多利斯），培养箱（德国宾得），BSC-1304ⅡA2生物安全柜（苏净安泰）。

（2）试剂

培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）、胰酪大豆胨液体培养基（TSB）、 沙氏葡萄糖液体培养基（SDB）。

稀释液：PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液、中和剂（含3%吐温80、0.3%卵磷脂、1%皂素的PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液）、含5%吐温的PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液。

实验菌种：铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉，均由中国食品药品检定研究院提供。

2 方法适用性试验

2.1 菌液的制备

取保存在TSA斜面培养基上的铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的培养物适量接种至10 mL 的TSB培养基内，置30～35℃培养18～24小时。……