李扶昆

（乐山职业技术学院药学系，四川乐山 614000）

佛手（Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle）为芸香科柑橘属植物，干燥果实可入药，具有和胃止痛、疏肝理气、燥湿化痰之功效[1]。

1 仪器与材料

Bruker-600M核磁共振仪（美国布鲁克公司）；Varian-500 核磁共振仪（美国瓦里安公司）；Agilent 6320 型液质联用仪（美国安捷伦公司）；Hanon P850型旋光仪（济南海能仪器股份有限公司）；LC-3000半制备高效液相色谱仪（北京创新通恒科技有限公司）；Thermo BDS-C18（10mm×250mm，5μm）色谱柱（美国赛默飞公司）；GF-254薄层色谱硅胶板（烟台江友硅胶开发有限公司）；正相硅胶（青岛海洋化工厂）；反相硅胶（德国Merk公司）；葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20（瑞士Pharmacia 公司）；HPLC所用甲醇和乙腈（美国MREDA公司）；实验过程中所用的乙醇、甲醇、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯等试剂均为分析纯（天津大茂试剂厂）。

佛手药材于2019年10由四川乐山沙湾区蜀景苑佛手柑种植基地提供，并由秦运潭副教授（四川省食品药品学校）鉴定为佛手柑Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle，标本现存放于乐山职业技术学院药物研究中心（编号：CS201910）。

2 提取分离

干燥佛手柑药材5kg，切碎后用90 %乙醇（10L/次）超声提取3次，每次0.5h，减压浓缩3 次提取液，得浸膏180g。在浸膏中加入2L水混悬，然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶剂后分别得到石油醚部位（25g），乙酸乙酯部位（40g），正丁醇部位（60g）。

乙酸乙酯萃取部位（40g）首先进行硅胶柱（200～300目，800g）色谱分离，用二氯甲烷-甲醇（10∶1，5∶1，2∶1）梯度洗脱，得到6个粗流分 Fr.1～Fr.6。Fr.2经硅胶柱色谱二次分离，用石油醚-丙酮（3∶1→1∶3）梯度洗脱，得到3个主要流分Fr.2-1～Fr.2-3。Fr.2-2经Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱（二氯甲烷：甲醇，1∶1）色谱分离，得到3个主要流分Fr.2-2-1～Fr.2-2-3。Fr.2-2-2经HPLC（乙腈-水，55 %）色谱分离，得到纯化合物3（7mg）；……