胶体金免疫层析技术在猪病毒病诊断中的应用与研究进展
2021-01-08肖璐谢晶曹冶叶勇刚于吉锋廖党金林毅李兴玉魏勇叶健强潘梦康润敏
畜牧与兽医 2021年1期
肖璐,谢晶,曹冶,叶勇刚,于吉锋,廖党金,林毅,李兴玉,魏勇,叶健强,潘梦,康润敏
(四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室,四川 成都 610066)
胶体金(colloidal gold)又叫金溶胶,是氯金酸在还原剂的作用下形成一种带有负电荷的稳定的疏水金颗粒悬液,胶体金颗粒能够对多种生物高分子物质进行吸附结合,且这种结合不会影响其生物特性,是免疫反应的理想标记物。胶体金标记技术以胶体金颗粒为核心,将其作为示踪标志物,是一种新型免疫标记技术。胶体金检测技术主要包括:斑点免疫金渗滤法(dot immunogold filtration assay, DIGFA)和胶体金免疫层析法(immunochromatographic test strip, ICST),目前在猪病诊断、检测领域中使用最为广泛的当属ICST。
1 研究背景及原理
在1857年,英国学者采用还原法从氯金酸水溶液中成功地制备出了胶体金,并发现了其能发生颜色变化,这一发现对胶体金技术发展具有重要的意义。上世纪60年代Feldherr等提出以胶体金作为电子显微镜的示踪标志物;70年代,Faulk等首次建立了基于胶体金的检测技术,开创了该技术在免疫分析领域应用的先河;80年代末至90年代初,Spielberg等研究学者为了检测抗HIV的斑点免疫金渗滤试验从而最早地建立了DIGFA,Beggs等建立了一种更加简便快速的免疫学检测技术,即ICST,最早用于人尿和血清中HCG的检测。此后,胶体金作为一种新型免疫标记技术得到很快发展。
ICST以硝酸纤维素膜为载体,利用毛细管作用将已知的特异性抗原或抗体固定于膜上作为检测带;将胶体金标记物置于玻……
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