刘敬天义，何培娟，董芳芳，陈申申，姚火春，潘子豪

(南京农业大学动物医学院/世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室，江苏 南京 210095)

猪链球菌(Streptococcussuis)是一种重要的人畜共患病病原，在世界范围流行，对生猪养殖业和人的健康都带来严重威胁[1]。根据荚膜多糖的抗原成分不同，将猪链球菌分成29个血清型(1～19，21，23～25，27～31和1/2)以及1个Chz型和20个NCL型[2]，其中2型和9型在临床分离中较为多见，猪链球菌致病机制和毒力因子的研究多见于2型。细菌感染动物后出现多种临床表现，如败血症、脑膜炎、心内膜炎和关节炎，严重时会导致多器官衰竭造成死亡[3]。2005年四川省暴发猪链球菌并造成215人感染，38人死亡[4]。世界范围内已有4例猪链球菌1型感染人的报道[5]，国内出现2例[6-7]，应引起足够的重视。由于猪链球菌1型的分离菌株较少，对该血清型的基因组分析数据有限。本研究从发病的仔猪气管中分离出1株链球菌，经分子生物学鉴定为猪链球菌1型，并对其开展致病性试验以及基因组测序分析。

1 材料与方法

1.1 病原菌的分离纯化

病料取自广东省某生猪养殖场暴发肺炎的患病猪，采集濒死断乳仔猪和育成猪的肝脏、肺脏和关节囊液用于病原分离，共45份样品。

1.2 实验动物

AB纯系斑马鱼购自南京夫子庙明海水族馆，5周龄SPF级BALB/c小鼠购自南京青龙山动物繁殖场。动物试验在南京农业大学实验动物中心[许可批号：SYXK(SU)2017—00071]进行。

1.3 主要试剂

THB粉末(Todd—Hewitt broth)购自美国BD公司；无菌绵羊血购自江苏省疾控中心；抗生素购自北京鼎国生物技术有限公司；……