何廷美，陈善瑜，施小刚，柴宜均，樊佳琦，罗静怡，程跃鸿，彭广能*

（1.四川卧龙国家级自然保护区管理局 四川阿坝 623006；2.四川农业大学动物医学院 成都 611130）

芽囊原虫（Blastocystis）是一种可寄生于人类和多种动物的厌氧性、单细胞肠道原虫，在全球广泛分布，主要经过粪口以及接触传播[1]。先前的报道表明，该寄生虫与腹泻、腹痛和呕吐等非特异性胃肠道症状相关，并疑似与肠易激综合征（IBS）和荨麻疹有关[2]。根据小亚基核糖体RNA（Small-subunit ribosomal RNA，SSU rRNA）基因序列差异，芽囊原虫目前可分为17 种亚型（ST1～ST17），其中ST1～ST9、ST12 亚型为人兽共患亚型，ST10～ST17 亚型仅感染动物[3]。芽囊原虫已在人和多种动物中被报道，其中鹿科动物被报道的有梅花鹿、马鹿、驯鹿[2,4,5]。2020 年4 月至5 月在对四川卧龙自然保护区野外野生动物肠道寄生虫进行调查的过程中发现采集的水鹿（n=9）、毛冠鹿（n=4）粪便样品检出芽囊原虫并鉴定出所感染的亚型分别为ST14（n=2）、ST5（n=1)、ST13（n=1）。据查未见有关于水鹿、毛冠鹿感染芽囊原虫的报道。该调查扩大了芽囊原虫的宿主范围且提示水鹿是传播人兽共患芽囊原虫的潜在宿主，具有一定的公共卫生学意义。

1 基本情况

2020 年4 月-5 月对卧龙自然保护区野外野生动物肠道寄生虫调查时采集到的9 份水鹿（Rusa unicolor）粪便和4 份毛冠鹿（Elaphodus cephalophus）粪便。随后针对该粪便样品基于SSU rRNA 序列的PCR 扩增方法检测芽囊原虫。

2 方法

2.1 粪便基因组DNA 的提取

每份粪便取200～300mg 置于2mL 离心管中，加入蒸馏水，混匀，12,000r/min 离心1min，弃上清，重复上述步骤直至清洗干净表面的重铬酸钾得到清亮透明的液体。随后按照E.Z.N.A.®Stool DNA Kit粪便全基因组提取试剂盒（OMEGA Biotek Inc D4015-01，USA）说明书的操作步骤提取DNA，操作完成后将DNA 放于 -20℃冰箱中待用。……