敲减SATB1抑制结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭
2021-01-06陈超冯长松张伟丽李先维
陈超 冯长松 张伟丽 李先维
(信阳职业技术学院 1医学院,河南 信阳 464000;2附属医院内科)
结肠癌是常见的恶性肿瘤,肿瘤细胞恶性表型与肿瘤细胞中相关基因的异常表达有关,研究肿瘤细胞恶性表型分子机制对于研究肿瘤发生机制和肿瘤的治疗具有重要意义〔1〕。核基质结合区结合蛋白质(SATB)1在T细胞、前B细胞及神经和骨髓组织中表达水平较高,而在正常组织中的表达水平较低〔2〕。近年来的研究发现,SATB1与肿瘤的发生有关,其在乳腺癌、肺癌等肿瘤中异常高表达,并且在肿瘤的转移中发挥促进作用〔3,4〕。在甲状腺癌中发现敲低SATB1具有抑制肿瘤细胞侵袭的作用〔5〕。目前有研究已经发现SATB1在结肠癌中阳性表达率明显高于癌旁组织,SATB1可能参与结肠癌细胞恶性增殖和转移过程〔6〕。本实验探讨敲减SATB1对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等恶性生物学特性的影响。
1 材料与方法
1.1材料 结肠癌SW480细胞购自南京科佰生物科技有限公司;阴性对照慢病毒和SATB1 shRNA重组慢病毒由南京双领生物科技有限公司构建;Revert Aid第一链cDNA Synthesis试剂盒、Power SYBR Green PCR Master Mix购自美国Thermo;钙黏附蛋白E(E-cadherin)抗体、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-9抗体、波形蛋白(Vimentin)抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology;基质金属蛋白酶(MMP)-9抗体、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3抗体、MMP-2抗体购自美国Cell Signaling Technology;SATB1抗体购自美国Abcam。
1.2慢病毒感染和分组 SW480细胞分成3组,分别为:SW480-WT组、SW480-sh-NC组、SW480-sh-SATB1组,SW480-WT组为不感染慢病毒的野生型SW480细胞,SW480-sh-NC组、SW480-sh-SATB1组分别为感染阴性对照慢病毒和SATB1 shRNA重组慢病毒的SW480细胞。SW480细胞接种到……
