崔杰 耿利民

肺癌是全球癌症死亡的重要原因，其发病率和死亡率一直居高不下，严重威胁着人们的身体健康[1-2]。肺癌的发生与发展是一个多因素、多阶段和多基因调控的复杂过程，其发生发展的分子机制尚不完全清楚。微小RNA(microRNA，miRNA)是一类由17-25个核苷酸组成的非编码RNA，可调控人类约30%基因，与肿瘤的发展发展密切相关[3]。既往研究[4-5]显示，miRNA可通过与相关靶基因3’非翻译区(3’-untranslated region，3’UTR)特异性结合影响细胞功能在肺癌中发挥着癌基因或抑癌基因的作用。越来越多的研究[6-8]显示，miR-190在结直肠癌、乳腺癌和胰腺癌等多种肿瘤组织中异常表达，且可通过调控细胞增殖、侵袭和上皮间质转化等参与肿瘤的发生发展。已有学者[9-10]指出，miR-190在肺癌中表达上调，且与患者预后密切相关，但其在肺癌中的作用并不清楚。本研究旨在探讨miR-190低表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制，以期为肺癌的发生发展机制及治疗提供新线索。

资料与方法

一、实验材料

人肺癌细胞株A549(中科院上海细胞库)，miR-190模拟物、miR-190抑制剂及其阴性对照(广州锐博生物公司)，DMEM培养基、胎牛血清和青链霉素(美国Hyclone公司)，胰蛋白酶(北京鼎国生物公司)，脂质体2000(美国Invitrogen公司)，辣根过氧化物酶标记的二抗(碧云天生物公司)，Trizol试剂(康为世纪生物公司)，兔抗人生长分化因子11(growth differentiation factor 11，GDF11)和β肌动蛋白(β-actin)单克隆抗体(美国Abcam公司)，噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide，MTT)试剂和二甲基亚砜(美国Sigma公司)，二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid，BCA)蛋白浓度测定试剂盒(美国默克生物公司)，反转录试剂盒(美国Life Technologies Corp公司)，荧光素酶报告基因检测试剂盒和膜联蛋白 V-FITC(Annexin V-FITC)细胞凋亡检测试剂盒(北京博迈斯科技公司)，psiCHECK-2荧光素酶载体(西安赛拓博泰生物)。……