张跃清

（盈江张跃清口腔诊所，云南 德宏傣族景颇族自治州盈江县）

0 引言

当机体抵抗力低下或出现菌群失调时，假丝酵母菌会侵犯机体多个部位，引起各种假丝酵母菌病。念珠菌会不会致病，取决于念珠菌的毒力、念珠菌的数量、念珠菌的入侵途径与机体的适应性、机体的抵抗力等因素。婴幼儿因其免疫系统尚未完全发育，为念珠菌感染的好发人群。成年人口腔念珠菌感染中，最大的影响因素是全身系统性疾病及其他口腔粘膜疾病，如大手术、肿瘤化疗后、干燥综合征、HIV 感染等。按其主要病变部位可将口腔念珠菌分为：念珠菌性口炎、念珠菌性唇炎与念珠菌性口角炎和慢性粘膜皮肤念珠菌病。念珠菌性口炎又可分为急性假膜型、急性红斑型、慢性肥厚型和慢性红斑型。急性假膜型又称为鹅口疮、雪口病，是由白色念珠菌感染引起的口腔粘膜急性假膜性损害，属婴幼儿常见的口腔炎症，尤其在新生儿及小于六个月婴儿最多见。病损区粘膜会出现充血水肿，会有散在的柔软小斑点，形状如凝乳，呈半黏附性略微高起；不久后相互融合形成白色或蓝白色斑片，之后并继续扩大延伸，严重的患者可导致扁桃体、咽部损伤。过数天后，病损部位的粘膜充血减退，斑片的颜色会由白色转变为淡黄色，最后变为黄褐色。斑片与粘膜部分粘在一起，我们稍加用力才可以擦去，强行撕开后会露出红色粘膜的糜烂面或者会出现轻度出血。既往研究发现口腔白色念珠菌在家族传播中的基因会呈现多态性，这与口腔变形念球菌（mutans Streptococci， MS）传播的基因多态性结果相类似[1]。有学者认为约有10%的口腔白斑患者伴有念珠菌的感染[2]。有学者认为口腔扁平苔藓（OLP）患者常存在使念珠菌成为条件致病菌的易感因素[3]。有学者认为口腔扁平苔藓发生恶性转化与念珠菌有关[4]。

1 念珠菌的生物学特征及鉴定

1.1 念珠菌生理学特征

菌体呈圆形或卵圆形，大小2μm×4μm，革兰染色阳性。繁殖方式为出芽繁殖，孢子可伸长成芽管，不与母细胞脱离而形成假菌丝。白假丝酵母菌在普通琼脂、血琼脂和沙保培养基上均生长良好。生长条件为需氧，室温或37℃下1-3 天，菌落表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母气味。再玉米Tween-80 培养基上25℃培养可长出厚膜孢子。

1.2 厚孢子、芽管形成实验

厚孢子形成试验是白假丝酵母菌的重要鉴定实验之一。将待测白假丝酵母菌接种至玉米吐温—80 琼脂做小培养，置25℃孵育，每天于显微镜下观察，在72 小时内可观察到丰富的假菌丝，假菌丝中隔部伴有成簇的圆形分生孢子，绝大部分菌株在假菌丝顶端有单个、最多不超过2 个厚孢子。

芽管形成实验是一种价值大且简单快速推断性鉴定白假丝酵母菌方法。方法：取少量待测菌接种至0.5-1mL 血清（兔、人或小牛血清），混匀，37℃水浴箱中孵育2-3 小时，每隔一小时用接种环取一点菌液置于载玻片上，加盖玻片后镜检，观察有无芽管形成。绝大部分白假丝酵母菌可形成典型的放大镜柄状芽管，2-3 小时别的假丝酵母菌一般不会形成芽管。注意孵育时间不超过四小时，否则其他酵母菌也会将出芽而影响鉴定结果。

1.3 TTC 试验

将假丝酵母菌接种于含0.005%氯化三苯四氮唑（Triphenyl tetrazolium chloride， TTC）的沙保培养基中，22-25℃经24-48 小时培养，白假丝酵母菌不变色或仅淡红色，热带假丝酵母菌深红色，其他假丝酵母菌或酵母菌为红色。现在临床用的商品化产色培养基如科码嘉念珠菌显色培养基（CHRO—Mager），可快速鉴定白假丝酵母菌和其他假丝酵母菌。

1.4 糖同化或发酵试验

假丝酵母菌如果会发酵某种糖，一定会同化该种糖，所以此实验只需要做不被发酵糖的同化试验。糖发酵试验是将待测菌接种于糖发酵管25℃孵育2-3 天观察结果，同化试验是在基础培养基中分别加入各种糖及接种待测菌，观察有没有酵母菌生长或所用培养基是否变混浊。

1.5 药敏试验

白假丝酵母菌对两性霉素B、三唑类（如氟康唑、伏力康唑、伊曲康唑、泊沙康唑等）、棘白菌素类（如卡泊素净、米卡芬净等）、5-氟胞嘧啶等药物敏感，但对5-氟胞嘧啶特别容易产生耐药性。

1.6 最新研究

①抗原检测，通过酶联免疫吸附、免疫印迹等检测有无白假丝酵母菌的抗原。②抗体检测，用酶联免疫夹心法、免疫酶斑点试验诊断患者血清中是否有相应抗体，也可做胶乳凝集试验和对流免疫电泳试验等检测血清中抗白假丝酵母菌抗体。③G 试验 也称螯试验，可测定1，3—β—D 葡聚糖，后者是多种真菌细胞壁的共同成分，若在血液或无菌体液中测出1，3—β—D 葡聚糖，是深部真菌感染的标志。④核酸检测，用分子探针检测经PCR 法扩增的白假丝酵母菌DNA 分子，具有较好的敏感性和特异性。⑤动物试验，取白假丝酵母菌悬液（约10 的十次方/mL）1mL 从家兔耳沿静脉注入或取0.2ML 菌悬液从小白鼠尾静脉注射，观察5-7 天看实验动物是否发病或死亡。解剖时如果发现脏器有多种小脓肿，即为白假丝酵母菌感染，因为其他假丝酵母菌对动物无致病性。

2 糖尿病与白色念珠菌口炎的关系

有学者认为口腔白色念珠菌病产生，使得患者的生命健康和生活质量产生极大影响， 因此加强对糖尿病合并白色念珠菌口炎患者诊断和治疗的积极研究尤为重要[1]。那对于有糖尿病的患者来说，检查是否有念珠菌的感染及其重要。那念珠菌的感染很广泛，如何才能做到精确的诊断出念球菌感染的部位或器官？这对于广大临床医生来说也是一个不小的挑战，念珠菌感染症状不一定相同，那当念球菌处于潜伏期感染的患者应如何检测呢？这就需要检测这拥有一双明亮的眼睛，医疗机构有一套健全的检测流程。需要广大人民群众适当的做体育锻炼，丢弃不合理的行为习惯，增强自身抵抗力，适量饮酒，戒烟，预防慢性病的发生。

3 益生菌与口腔疾病的关系

乳杆菌属（嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳 杆菌、罗伊氏乳杆菌、丙酸杆菌等）和双歧杆菌属是最早被学者发现的口腔益生菌。口腔感染性疾病主要包括龋病、牙髓根尖周病、牙周病以及颅颌面部其他软组织和间隙感染，有学者认为口腔念珠菌病等口腔疾病中发挥着重要作用[2]。益生菌对牙周病的影响机制目前尚无定论。有学者报道副干酪乳杆菌能分泌一种细菌素可以显著抑制牙龈卟啉单胞菌的生长[3]。有学者研究发现乳酸杆菌和白色念珠菌一起培养后能有效抑制白色念珠菌的生长[4]，那研究者是否能通过一定的手段，在患念珠菌感染的患者中食入或引入乳酸杆菌，能否达到治愈念珠菌感染患者的目的呢？这还有待于做深入的研究。

4 纳米细菌与口腔疾病关系

何为纳米细菌呢？顾名思义纳米细菌首先是一种细菌，其次它的个体微小，是一种有着独特钙化能力的微粒。近年来纳米细菌被发现与许多口腔疾病的发生密切相关。到底纳米细菌与口腔疾病有啥不可告人的秘密呢，接下来我们一起来看看。经学者研究，在人的唾液、齿面、牙结石、牙菌斑和牙髓石中均存在着大量纳米细菌。因为纳米细菌在生长过程中，所产生的羟磷灰石结晶同样存在于涎腺结石中，所以也有许多学者认为纳米细菌与涎腺结石的产生有关。那纳米细菌是如何产生的呢？它对生长环境有没有特殊的要求，要如何才能抑制纳米细菌的生长呢，这有待对纳米细菌进行深入的研究和探索。

5 念珠菌的争议

假丝酵母菌病（又称念珠菌病）是由各种致病性假丝酵母菌引起的局部或全身性感染，好发于机体免疫低下的患者，为最常见的深部真菌病。假丝酵母菌病患者、带菌者以及被假丝酵母菌污染的食物、水、医院等环境是本病的传染源，由定植于体内的假丝酵母菌在一定条件下大量增殖并侵袭周围组织引起自身感染较为多见，也可通过直接接触等传播。念珠菌属于正常菌群，白假丝酵母菌与口腔的其他疾病的发生都有关系，对于酵母菌属的其他真菌对疾病的发生有无影响，影响作用有多大还有待于研究。念球菌感染极大地影响了患者的生活质量，寻求安全有效的治疗手段也成为临床医生最大的挑战。

6 展望

综上所述，念珠菌与多种疾病的发生都有关联，糖尿病合并感染白色念珠菌，极大影响患者的健康和生活质量。乳酸杆菌和白色念珠菌一起培养能抑制白色念珠菌的生长，深入的研究为临床医生诊断相应的念珠菌感染提供方向，提供治疗相应念球菌感染的措施，造福于广大念球菌感染患者。