●胡相伟（甘肃省兰州市生态林业试验总场 甘肃 兰州 730085）

近年来，随着信息网络技术、生物基因技术、农业工程技术、材料科学技术的发展，植物组织培养产业开始迎来新一轮蓬勃发展的机遇，植物组织培养技术在现代农业、林业、花卉业、生物医药领域也发挥着越来越重要的基础性支撑作用[1]。植物组培苗炼苗移栽生根是关系到工厂化育苗成败的关键环节，其技术也不断进步革新。在生产实践中，除了常规培养操作和应用现代温室、农业工程自控技术外，对于难生根的木本植物组培苗，生根率低、组培苗成活率低是重要制约因素[2]。近年来，土壤微生物学发展迅速，针对生根难问题，促进植物生长的根际促生菌不断得到分离、鉴定、培养和应用。其中对植物有保护和促生作用的根际促生菌——荧光假单胞菌“营广宝”近年来得到实际应用，该菌剂能够保护植物根系免受其他菌类危害，促进植物生长和根系更好发育[3,4]。

在传统植物组织培养生根炼苗移栽中，主要依靠保湿炼苗，很少考虑基质问题、气体环境和光照问题。湿度提高后，基质菌类滋生，气体环境恶化，组培苗气孔功能差，加上光照控制不当，造成烂根、枯萎、灼伤[5]。近年来二氧化碳捕集剂技术迅速发展，引起世界研究热潮[6]，喷施以小球藻为核心的生物制剂有利于植物茎叶捕集空气中的二氧化碳，提高单位浓度，进而提高光合效率[7]。基于工厂化育苗的三大核心问题，笔者在河北杨植物组织培养苗工厂化微枝生根炼苗移栽育苗实践中，总结出利用顶端优势、微生物促生、光合作用原理三者结合的试管外生根育苗集成技术，提高了生根率和成苗率，达到了降本增效的目的，该技术关键步骤有组培苗微枝打顶促茎闭瓶炼苗、根际促生菌蘸根和二氧化碳捕集剂喷施培养等。具体操作总结如下，仅供广大组培种苗业同行们参考。

1 河北杨组培苗微枝打顶促茎闭瓶炼苗

在河北杨组培苗微枝繁殖到一定基数快出苗时，在超净台上，将顶芽（3节）单独切取后，余下枝段每隔2～3个叶片剪取作为插段，接种在生根出苗培养基（1/2MS+IBA 0.5mg/mL+蔗糖15g/L+琼脂5%，pH6.0）上。此时将生根处理组培苗转移到炼苗环境中边炼苗边培养，最好换用透气盖培养，培养温度23～25℃，光照12h/d，在10d内，逐步加强光照，直至移到光照强度达8 000lx的培养架进行培养。等到新顶芽形成，茎干粗壮，叶片加厚，颜色浓绿，苗木健壮整齐时打开瓶盖，剪取上部粗壮微枝移入温室用于生根移栽，而基部留1～2个芽，添加适量无菌培养液继续盖瓶盖培养，以备下次切取微枝进行移栽生根。

2 河北杨组培苗微枝用根际促生菌蘸根

在适宜林木培养的63#穴盘中装入丹麦品氏专业育苗基质，以保障无菌、无病虫害、无杂草种子、无有害矿物质，免除使用杀虫杀菌剂进行基质消毒的麻烦和带来的基质污染，以及后期拔除杂草带来的管理问题，以提高炼苗移栽效率和保障快速生根与根部生长。将高5cm左右的河北杨试管苗微枝，用镊子轻轻夹取，基部1～2cm速蘸植物促生菌“营广宝”原液，促进试管苗微枝迅速生根生长和防治其他菌类滋生感染，形成具有保护作用的定植菌和促生菌。再扦插入用63#育苗穴盘装丹麦品氏育苗基质中进行移栽，在智能温室条件下，相对湿度控制在85%左右，光照控制在1 000lx，温度控制在25℃左右进行生根培养。

3 河北杨组培苗微枝二氧化碳捕集剂喷施培养

二氧化碳捕集剂促进组培苗光合作用，还可促进河北杨组培苗炼苗移栽，提高组培苗炼苗成活率。移栽完的河北杨组培苗相对湿度保持在85%，喷施1 000倍液二氧化碳捕集剂——光碳核肥，形成河北杨组培苗良好气体环境，以后每15d喷施1次，每天早晨通风换气20min。光照从8 000lx逐步提高至15 000lx,加速提高河北杨组培苗微枝光合自养能力，促进生根，形成完整植株。

4 总结

上述河北杨组培苗微枝打顶促茎闭瓶炼苗，利用顶端优势原理，使组培苗微枝嫩茎得到充分利用，使种苗整齐、健壮利于移栽。河北杨组培苗微枝用根际促生菌蘸根，促生菌保护基部免受杂菌感染和危害，改善根际环境，分泌生根生长物质，促进生根。二氧化碳捕集剂喷施培养，创造高浓度光合环境，抑制菌类和病虫害滋生，促进叶片光合作用，利于河北杨组培苗微枝健壮生根和生长。这样培养的河北杨组培苗猝倒病和根癌病的发病概率大大降低，实践中生产河北杨组培苗52万株，移栽效率提高了45%，平均生根成活率由原来的78%提高到92%，苗木整齐健壮，商品性好。最重要的是全程不使用杀菌杀虫剂和植物生长调节剂，绿色环保无污染，保护生态环境。这种集成技术操作简单、实用，是微枝试管外生根炼苗技术的应用与提升，有利于木本植物组培苗微枝外生根炼苗培养，尤其是难炼苗的木本植物，能显著提高生根炼苗移栽效率和成活率，具有广阔的应用前景。