黄菲菲，张 阳，汪 洋，李先根，王秀英，朱惠玲，刘玉兰，肖 勘

（武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室，湖北武汉 430023）

肠道不仅是营养物质消化吸收的主要场所，也是重要的免疫器官，能够抵御外来病原入侵[1]。应激会造成肠道屏障功能障碍，导致肠道通透性增加并引起黏膜损伤[2]。肠道损伤后的修复包括上皮细胞的增殖、分化、成熟和迁移等复杂过程[3]。Xu 等[4]研究发现，转化生长因子β（TGF-β）信号通路在肠黏膜损伤的修复中发挥着关键作用。

TGF-β是一类多肽细胞因子超家族，包括TGFβs、活化素和抑制素等[5]，其中TGF-βs 最受关注。哺乳动物基因组可编码3 种不同的TGF-β亚型，即TGF-β1、TGF-β2 和TGF-β3[6]，其中TGF-β1 在哺乳动物体内的比例最高，且能参与细胞的创伤修复过程[7-8]。TGF-β1 信号通路主要由Smads 分子介导[9]。Smads 蛋白接受信息并传递至胞内，发挥其信号传导作用[10]。Smads 蛋白分为受体激活型Smad（R-Smad，包括Smad2 和Smad3）、共介导型Smad（Co-Smad）和抑制型Smad（I-Smad，主要有Smad7）3 种。TGF-β1 能够促进伤口愈合[11]，还与仔猪断奶应激后肠道屏障功能的恢复有关，在TNF-α刺激后，TGF-β1 通过激活Smad 和MAPK 信号通路保护肠道完整性[12-13]。现阶段尚无与TGF-β1 及Smads 信号通路在仔猪肠道损伤后的作用时期和修复机制相关的报道。

本研究以脂多糖（LPS）构建肠道损伤模型，探究LPS 刺激后不同时间点，肠道损伤修复中的关键因子TGF-β1 以及Smads 信号通路的动态变化，为营养调控肠道损伤修复寻找合适的时间点和调控靶点。

1 材料与方法

1.1 试验试剂 LPS：大肠杆菌血清型O55:B5（购于Sigma 公司）；RNA 提取所用TRIzol 试剂、反转录所用PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser 试剂盒以及实时定量PCR 所用TB GreenTMPremix Ex TaqTMII 试剂盒均由宝日医生物技术有限公司（TaKaRa 中国）提供。……