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猪圆环病毒病的分离、鉴定与防治

2020-12-16陈林杰

中国畜禽种业 2020年1期
关键词:病料周龄圆环

陈林杰

(山东省蓬莱市畜牧兽医站 265600)

1 猪圆环病毒病的病原分析

猪圆环病毒属于圆环病毒科圆环病毒属,根据血清型不同可以分为PCV1、PCV2。 PCV2 是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原体。 该病毒在世界范围内广泛存在。 猪圆环病毒对环境的抵抗能力较强,酸性环境及72℃的高温环境中也可存活,猪只对圆环病毒具有易感性,感染猪只能通过口鼻分泌物或粪便将病毒排出体外污染环境,不同年龄的猪只均可以通过呼吸道感染患病。

2 猪圆环病毒病的临床症状

猪圆环病毒病主要发生于断奶仔猪,能导致此猪发生呼吸困难、淋巴组织病变、贫血、逐渐消瘦等主要病症。 患病仔猪主要表现为逐渐消瘦、生长发育缓慢,呼吸困难,精神萎靡等。 发病率为4%~25%,死淘率较高,可达到25%~40%左右。具体病症可分为断奶仔猪多系统衰竭综合性征,猪皮炎肾病综合征,猪呼吸道疾病综合征及母猪繁殖障碍。

2.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征

断奶仔猪多系统衰竭综合征主要发生在5~12 周龄的保育猪中。 在临床诊断过程中可发现患病仔猪呈渐进式消瘦,呼吸急促或呼吸困难,皮肤苍白,有腹泻症状,全身淋巴结出现病理性肿大。 对患病仔猪进行解剖可见肺部有明显的出血点。

2.2 猪皮炎肾病综合征

2~4 月龄的猪只感染圆环病毒主要表现为皮炎肾病综合征。在临床诊断中可见猪只体表有多处部位发生轻微暗红色病灶,发病后快速出现发热症状,患病猪直肠温度可高达41℃以上,水肿症状明显,食欲降低,体重下降,严重的精神萎靡。 通常在观察到以上临床症状后3d 内即会发生死亡。 猪皮炎肾病综合征的死亡率大概为20%左右。 患病猪只的病理变化主要表现为坏死性皮炎及出血症状,同时会伴随胸腔积液和心包积液。此外,在仔猪发生皮炎肾病综合征时通常伴随着断奶仔猪多系统衰竭综合征。

2.3 猪呼吸道疾病综合征

猪呼吸道疾病综合征主要发生在16~22 周龄的猪只中。 在临床诊断上可见患病猪只生长发育十分缓慢,采食量降低,同时伴随着咳嗽症状,患病猪只也会表现出呼吸困难。 解剖病死猪可见其支气管发生间质性肺炎,肺部有肉芽肿出现[1]。

2.4 母猪繁殖障碍

母猪感染圆环病毒会出现严重的繁殖障碍。 主要表现为妊娠期间发生流产或生产死胎。 部分患病母猪会发生早产,所生产的仔猪在断奶前死亡率很高。 部分感染圆环病毒的母猪可能会出现不孕现象,增加死淘率。 并且圆环病毒病可以通过胎盘进行垂直传播,母猪患病会影响仔猪成活率及健康。

3 猪圆环病毒病的分离鉴定

3.1 猪圆环病毒的分离培养

对猪圆环病毒病的分离鉴定是对该病的一种诊断方式,采集病死猪只的病变组织作为病料进行细菌分离培养与鉴定。 病料组织使用无菌生理盐水进行冲洗后制作组织悬液,反复冻融3 次,5000r/min 离心 25min 后取上清液,过滤后低温保存。 取组织病料进行PCR 检测。 将PCR 检测结果为阳性的病料组织接种于PK-15 细胞悬液培养瓶中,置于37℃环境中培养24h 后进行鉴定[2]。

3.2 猪圆环病毒的鉴定

目前所使用的病毒鉴定方法包括病毒的形态学观察、间接免疫荧光试验、荧光定量PCR 测定及动物人工感染试验。

3.2.1 病毒的形态学观察

无菌采集病料组织进行冻融,经过超声波粉碎后离心,取上清液并染色后置于电镜下对病毒的形态进行观察。

3.2.2 间接免疫荧光试验

采集病毒液接种于96 孔板上,PK-15 细胞也与病毒液一同接种,放置于恒温箱中培养24h,使用间接免疫荧光法进行染色,经过孵育及洗涤后,用PBS 封底后用荧光显微镜观察。

3.2.3 荧光定量PCR 测定

将病毒分离后进行培养,培养方式包括3 种,分别为: D-氨基葡萄糖培养基上同时接种病毒与细胞,置于37℃环境下培养48h; 在培养基中同时接种细胞和病毒,置于37℃下培养72h; 将病毒接种于单层细胞中,置于 D 氨基葡萄糖培养基中培养48h。 利用荧光定量技术根据荧光定量PCR 测定方法对3种方式培养的病毒进行鉴定,可确诊圆环病毒[3]。

3.2.4 人工感染试验

通过肌肉注射的方式将病毒接种于30 日龄未进行过免疫接种的猪只体内,并与未注射过病毒的猪只进行对比试验,分别隔离饲养,定期采集血液进行检测,观察猪只的健康状况、采食情况、体重变化、体温及临床表现,并进行PCR 检测、间接免疫荧光鉴定及血清抗体分析。

4 猪圆环病毒病的防治措施

4.1 免疫接种

免疫接种是目前预防疾病最有效的方式。 当前市场中所出售的猪圆环病毒病疫苗均可用于猪只防疫。 购买的产品疫苗都能在一定程度上对猪只起到保护作用。 其中基于抗原免疫原性全病毒灭活疫苗的预防效果最佳,具有一定的发展前景。 使用猪圆环病毒病疫苗对猪只进行免疫接种,最佳的注射时间是母猪产前的 2~4 周。

4.2 制定相应的免疫程序

优质的疫苗要配合科学合理的免疫程序才能发挥其最佳的免疫效果。 目前经过长期实践经验可知,在母猪生产前进行免疫接种,仔猪在2~4 周龄期间进行免疫接种的效果最佳。 母猪生产前进行免疫接种能为仔猪提供母源抗体,用于预防猪圆环病毒的感染,能有效预防母猪未感染,而仔猪被病毒感染的情况。 到仔猪8~9 周龄期间,仔猪体内的母源抗体会消失。 所以,需要对仔猪进行免疫接种,使免疫效果维持。 最佳的接种时间为仔猪2~4 周龄,此时母源抗体不会对疫苗产生干扰作用,同时能保证仔猪在断奶后获得免疫保护。 对仔猪进行免疫要保证在仔猪断奶前必须完成,防止断奶后感染猪圆环病毒病。

4.3 加强母猪分娩期管理

做好母猪分娩期的管理能预防新生仔猪感染圆环病毒病。做好分娩舍的消毒工作,控制好分娩环境,保证恒温恒湿、空气清新。 仔猪出生后要做好清洁消毒工作。 做好仔猪护理工作,新生仔猪抵抗力较弱,容易被病原体侵袭而感染患病。 新生仔猪要注意保温。 转舍时要做到全进全出,保证仔猪舍内卫生情况良好。 母猪生产前应进行必要的驱虫及清洁。 防止母猪交叉哺乳。

4.4 加强保育期及育肥期的管理

目前治疗猪圆环病毒病仍无特效药,并且该病是一种免疫抑制类疾病,对猪只健康及免疫效果有较大影响。 所以要加强对猪只的饲养管理,做好环境控制工作,对育肥猪和保育猪要做到分阶段独立饲养,禁止不同年龄的猪只混群,保证适宜的养殖密度,采取全进全出制度,定期对猪舍进行消毒,空舍期彻底消毒,严格执行猪场内的各项规章制度。 对于患病猪及时淘汰,并对尸体进行无害化处理,防止疫情扩散。

5 小结

猪圆环病毒病危害严重,对其治疗目前尚无有效措施。 在实际养殖生产中需要利用营养调控、环境控制、免疫接种等方式对该病进行预防。 养殖场需要重视对猪圆环病毒病的防控。在保证养殖户经济利益的同时要防止致病菌耐药性的出现,以促进养殖业的可持续发展。

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