冯晓东 刘风波 白建

(1，吕梁市农业学校 033000；2，襄垣县职业技术学校 046200；3，吕梁学院生命科学系 033001)

由于大肠杆菌的血清型繁多，加之近年来抗菌药物在临床上的滥用，使得大肠杆菌的耐药性不断增加，并出现多重耐药菌株，致使某些抗生素在防治大肠杆菌病时出现了疗效下降甚至无效的情况，给养殖业造成很大的经济损失[1]。

1 材料

1.1 病料

2019 年4 月由山西某鸡场提供的病、死鸡若干只，取其心、肝、脾和水肿液。

1.2 试验用品

琼脂平板、培养基和药敏试纸。

1.3 试验动物

小白鼠25 只（由山西农大动物预防医学实验室提供）。

2 方法

2.1 细菌的分离培养

无菌采集病死鸡的心、肝、脾等组织接种，37℃温箱培养18～24h，观察菌落形态。

2.2 实验室镜检

取麦康凯琼脂培养基的新鲜菌落，抹片，革兰氏染色镜检。

2.3 生化试验

糖发酵试验、吲哚试验、MR 试验、VP 试验、枸橼酸盐试验、硫化氢试验。

2.4 动物感染试验

准备25 只小白鼠，分为5 组，每组5 只。第1～4 组分别接种用麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、SS 琼脂和三糖铁琼脂斜面上的纯培养物所制作的肉汤培养物0.2ml；第5 组接种0.2ml 的肉汤作为对照组[2]。

2.5 药敏试验

将分离得到的细菌用生理盐水稀释，均匀涂抹在琼脂平板上，然后贴上恩诺沙星、环丙沙星、庆大霉素、氟哌酸、头孢噻肟、阿莫西林药敏试纸，37℃培养18h。

3 试验结果

3.1 细菌的分离培养

由表1 可知，分离菌在麦康凯琼脂上呈现红色菌落；在伊红美兰上的生长菌落呈紫黑色带金属光泽；分离菌能使三糖铁斜面变黄，底柱产气，但不产生H2S。

3.2 细菌形态观察

取新鲜菌落抹片，常规革兰氏染色，镜检可见单个或成对的两端钝圆、中等大小的粉红色的革兰氏阴性杆菌[3]。

3.3 生化试验

通过生化试验（表2）可以看出，该培养物可以发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖；还可以使吲哚试验和MR试验反应呈阳性；使VP 试验和硫化氢试验呈阴性。以上生化试验的结果符合大肠杆菌的生化试验特性，不符合沙门氏菌的生化特性（沙门氏菌不能发酵乳糖和蔗糖，且吲哚试验和VP试验呈阴性），可以初步判断培养物中没有沙门氏菌只有大肠杆菌[4]。

3.4 动物感染试验

由表3 可知，由分离培养基上分离的菌株都能致死小白鼠。在接种病菌12h 后，小白鼠开始出现食欲减少，饮欲增加，精神沉郁等现象；24h 后开始出现死亡，第2 组在48h 后全部死亡。对照组全部存活，且精神活泼，被毛光亮。无菌操作取一些病料接种于麦康凯琼脂培养基，可以得到与分离菌一样的细菌。所以，致死小白鼠分离得到的细菌是同一种菌。

3.5 药敏试验

由表4 可知，分离菌只对头孢噻肟敏感；而对恩诺沙星、环丙沙星、阿莫四林和氟哌酸不敏感，这可能是由于大肠杆菌耐药性所致。

4 小结

4.1 环境因素

如果饲养环境条件差，消毒不严，场地污染严重会造成鸡大肠杆菌感染。

4.2 防疫措施

如果防疫措施不健全，没有使用大肠杆菌疫苗或有传染病的鸡没有及时隔离、治疗；病鸡、健康鸡混养，都会促进传染。

4.3 日粮配制

如果日粮配制不合理，会降低鸡的抵抗力，加速大肠杆菌感染。

4.4 用药因素

表1 大肠杆菌与沙门氏杆菌在鉴别培养基上的菌落特征

表2 生化试验结果

表3 动物感染试验结果

表4 药敏试验结果

如果不坚持连续用药或未巩固治疗即停药，会使疫病复发；而本防治措施是在确诊的基础上针对病因，采取抗菌消炎和环境消毒，使大肠杆菌病得到控制。