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浅谈高效液相色谱仪日常维护经验

2020-11-23柴梅梅

食品安全导刊·下旬刊 2020年9期
关键词:液相色谱维护

摘 要:液相色谱仪可以说是日常分析工作最常使用的“武器”。作为一名液相色谱仪使用人员,一定要认真学习液相色谱仪操作规程,掌握液相硬件和软件的操作,养成良好的实验习惯。这样一来分析工作也可达到事半功倍之效。

关键词:液相色谱;维护;色谱柱;流动相

1 高效液相色谱仪

高效液相色谱,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,各成分在色谱柱内被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。高效液相色谱仪是应用高效液相色谱原理分析高沸点不易挥发、热不稳定和分子量大的有机化合物的分析仪器。它由储液容器、泵、进样器、色谱柱、检测器与记录仪等组成。

2 高效液相色谱仪各单元日常维护

2.1 储液容器

储液器是储存流动相的容器。储液器最好选用仪器公司配制的储液瓶,不要乱用;超过有效期的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃,防止瓶中生长微生物和组分改变;每个储液器要储存固定的溶剂;要保证储液器的清洁,定期清洗内壁,经常更换附件。

2.2 泵

提高泵的使用寿命主要有以下措施:时刻关注泵压大小,根据泵压变化及时发现漏液和堵塞的情况;使用缓冲液做流动相一定要用0.45 μm滤膜过滤;每次使用完要把泵中的缓冲液冲洗干净,防止盐分沉积,最好浸在有机溶剂中;使用过滤滤芯,并且定期清洗更换,防止泵阻塞。

2.3 检测器

保证检测器的清洁,每次使用后冲洗;做好排气工作,整个流路中只要有一个气泡就会在检测器上得到强烈的信号反映,所有流动相以及管路一定要排气,以防气泡残留在检测器内部;不要频繁开关检测器,频繁的开关会缩短灯的使用寿命,检测结束长时间不用时一定记得关灯。

2.4 自动进样器及进样阀的维护注意事项

样品在装瓶前必须用0.45 μm或0.22 μm滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损或阻塞;防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次检测结束后要记得冲洗进样阀,通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水沖洗。

2.5 色谱柱

日常检测工作中,对色谱柱的正确使用和维护非常重要。如果使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。因此,要注意以下5点。

①流速的调节,调节流速要缓慢,柱压的急剧变化会影响柱内的填充情况;②按照箭头方向安装色谱柱,不要反冲色谱柱,反冲会迅速降低柱效;③安装预柱和保护柱,并且定期更换;④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),使用前一定要仔细看说明书,在合适的pH范围内使用;⑤长时间不用或存放色谱柱时,柱内应充满溶剂(甲醇或乙腈),并拧上堵头。

3 液相色谱仪短期关机和长期关机的维护工作

3.1 液相色谱仪短期不使用时维护(两三天如周末不用)

短期不使用液相色谱仪时,首先用超纯水冲洗系统,尤其是在使用盐类缓冲液以后,以防盐结晶等有害沉淀留在管路中损坏仪器;然后用甲醇/水(甲醇比例由低到高逐渐增加)冲洗,再用纯甲醇冲洗30 min以上;最后关闭泵、检测器、进样器的电源[1]。

3.2 液相色谱仪长期不使用时维护(一周以上长期不用)

长时间不使用液相色谱仪时,一定要做在好彻底的维护以后关机。①清洗系统。如果流动相是有机相,只包括:甲醇、乙腈等,只需用100%甲醇清洗40~60 min即可关机;如果流动相是缓冲盐类,如:弱酸、弱碱(强酸碱绝对禁止进入仪器)、乙酸、乙酸铵、三氟乙酸、磷酸、氨水、三乙胺与磷酸盐等。清洗时,需要将缓冲盐的管路放入水相,然后用95%水+

5%甲醇清洗系统80~100 min,再用100%甲醇清洗40 min。②清洗完毕后,在工作站中关闭泵。③依次关闭检测器、泵、柱温箱的电源,关闭稳压电源,关闭工作站及电脑。④盖好防尘罩。

4 小结

操作液相色谱仪的工作人员,应在熟练掌握仪器操作的基础上,了解各个部件的性能,做好日常维护保养工作,从而保证仪器的良好状态,确保分析结果的准确可靠性。

参考文献

[1]林琎,穆卫,张瑞霞.高效液相色谱的操作保养及其注意事项[J].科学信息(学术研究),2008(4):98.

作者简介:柴梅梅(1985—),女,汉族,陕西米脂人,硕士,助理工程师。研究方向:食品中的添加剂及兽残的检验检测。

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