黄炎兰 吴 海

广西医科大学第一附属医院 广西南宁 530021

扩张型心肌病（DCM）是导致顽固性心衰的主要原因之一[1]，目前发生机制未清。免疫机制在其发病过程中起重要作用，已有研究及我们的前期研究表明，T细胞，尤其是Th17 细胞在DCM 的发病过程中起重要作用[2]，但是T细胞的活化需要共刺激因子的参与，CD80/CD86 是重要的共刺激因子[3]，由多种免疫细胞分泌，B细胞表达的CD80/CD86 是否参与DCM 的发病机制未见报道。本研究拟探讨DCM患者外周血B细胞CD80/CD86的表达，为进一步阐明DCM 的发病机制提供理论依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象与分组

扩张型心肌病组（DCM组）选自广西心血管研究所2018年1月-2019年5月间住院患者。DCM组患者30例，诊断标准参照2018年中国DCM 诊断与治疗指南[4]。其中男17例，女13例；年龄(51.18±14.62)岁。正常对照组(NC组)为广西医科大学第一附属医院健康体检者30例，男16例，女14例；年龄(50.39±15.32)岁；近期无感染史。两组年龄、性别差异无显著性。

1.2 实验方法

（1）标本采集：患者及健康对照均空腹采静脉血2ml，用肝素钠抗凝血用于流式细胞仪检测，6小时内完成。（2）流失细胞术：取200ul 静脉血用红细胞裂解液（BD 公司）裂解红细胞，用PBS洗细胞后离心5分钟，300×g，弃去上清液，用100ulPBS 重悬后，加入人CD19-PerCP-Cyanine5.5 抗体、CD80-APC 抗体和CD86-PE 抗体（均为BD 公司）各1ul，4℃避光孵育30分钟，用PBS 洗涤细胞，300×g，离心5分钟，弃去上清液，最后加300ul PBS重悬细胞，尽快上流式机检测。（3）流式细胞分析应用BD公司的FACS Canto II 流式细胞仪检测，用淋巴细胞圈出P1门，再用CD19圈出P2门（B细胞门）。最后根据细胞表面的CD分子所占比例B细胞比例得出B细胞表达CD分子的比例。……