陈 辉

（桂林理工大学体育教学部，广西 桂林 541004）

榆黄蘑（Pleurotus citrinopileatus Sing.）的特点为菌盖呈草黄色至鲜黄色，光滑，漏斗状，直径3 cm～10 cm，菌肉白色，柄偏生，菌盖鲜黄、油亮，形态优美喜人[1]。榆黄蘑既有味道鲜美、香味浓郁、营养丰富的食用价值，又有滋补强身的药用价值[2]。随着生活水平的提高，人们对饮料的需求量大大提高，果蔬饮料越来越受到人们的喜欢。市场上食用菌类型饮料较少，食用菌类的药理活性比较强，其保肝护肝、降血脂、降血糖的作用十分突出[3]。借助小鼠试验，对榆黄蘑制剂的抗疲劳作用、耐缺氧作用以及D-半乳糖的抗氧化作用进行试验，分析了榆黄蘑制剂抗运动性疲劳的功能，为后续相关新产品的创新与开发提供了新的思路，更好地满足人们的日常需求。

1 材料与仪器

1.1 试验动物

昆明种小鼠，体重约20 g，由延边大学试验动物科提供。选取150只小鼠。

1.2 药品与试剂

MDA试剂盒、T-SOD试剂盒、GSH-Px试剂盒，南京建成生物工程研究所；D-半乳糖（生产批号F20080429），上海国药集团化学试剂有限公司；同时聘请延边大学药学院吕惠子副教授对采购自黑龙江的野生榆黄蘑真伪进行鉴定。

1.3 仪器设备

HH-501超级恒温水浴箱，江苏金坛市恒丰仪器厂；VIS-723型分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；KA-1000低速台式离心机，上海安亭科学仪器厂；DY-Ⅱ型电动玻璃匀浆机；宁波新芝生物科技股份有限公司。

2 试验方法

2.1 制备榆黄蘑制剂

将新鲜的榆黄蘑子实体5 g浸在50℃蒸馏水中0.5 h，使用脱脂棉进行过滤，环糊精脱涩，同时加入稳定剂羧甲基纤维素钠（0.3%）0.5 g，并将黄原胶（0.01%）0.5 g、瓜尔豆胶（0.01%，pH 3.6～3.8）0.2 g加入其中，使用巴氏灭菌法对其进行灭菌处理后，制得榆黄蘑生药量为800 g的榆黄蘑制剂，使用时用蒸馏水稀释，将其制作成榆黄蘑质量浓度为660 g·L-1的制剂。使用蒸馏水对榆黄蘑制剂稀释后得到浓度为330 g·L-1和165 g·L-1的制剂，用这些制剂对小鼠进行灌胃。

3)当锚固段长度较小时，处于弹性变形阶段锚固剂-围岩界面剪应力可近似认为是均布的。随着锚固长度的增加，锚固始端最大剪应力值逐渐降低，界面剪应力分布不均匀程度增加。

2.2 力竭游泳试验

榆黄蘑制剂会对小鼠的皮肤组织丙二醛（MDA）含量和乳酸脱氢酶（T-SOD）活力以及全血血清乳酸（GSH-Px）造成不同影响，其具体情况详见表2。

取血完成以后，采取颈椎脱臼的办法将小鼠处死，使用浓度为8%硫化钠溶液对小鼠背部进行脱毛处理。同时选择0.4 g背部皮肤组织，漂洗背部皮肤组织的时候，使用冷却的生理盐水进行操作，将多余的脂肪组织处理干净，使用滤纸进行擦拭直至干燥，对其重量进行称取。同时与重量为9倍的冷却生理盐水一起放入到试管中，使用功率为3 000 r·min-1的离心设备进行离心处理5 min，选取上部清液。按照试剂盒使用说明对选择的清液进行相关指标的测定，获得皮肤组织中的MDA含量值和T-SOD活力[6]。

2.3 常压耐缺氧试验

榆黄蘑制剂组在灌胃35 d以后，与空白组进行对比，小鼠的常压耐缺氧时间和力竭游泳时间都发生显著变化，高剂量组和中剂量组变化最为明显。剧烈运动和缺氧运动会使局部肌肉血流变缓，需要通过糖酵解获得能量。糖酵解的过程中会释放出乳酸，乳酸会使肌肉的酸碱度发生变化，这就是造成疲劳的关键性诱因[7]。乳酸脱氢酶具有一定的催化作用，肝脏乳酸氧化成丙酮酸时、骨骼肌糖酵解中丙酮酸还原成乳酸时都发挥了积极的促进作用，并使其借助线粒体快速的融入到三羧酸中完成高效的循环。随着乳酸脱氢酶活性的不断增强，小鼠的力竭游泳时间和常压耐缺氧能力得到提高[8]。

2.4 抗氧化试验

小鼠被随机分成为5组，每组30只，分别是空白组、模型组和3个榆黄蘑制剂组。模型组和榆黄蘑制剂组小鼠每天使用10%的D-半乳糖进行皮下注射（0.01 mL·g-1），后持续注射榆黄蘑制剂时间为35 d，在此期间，每隔10 d注射1次D-半乳糖；使用生理盐水对空白组的小鼠进行注射。模型组和空白组小鼠每天灌胃等量的蒸馏水[5]。在最后1次灌胃1 h后，摘除小鼠的眼球进行取血，将样本放入到肝素抗凝试管里，按照试剂盒的说明对全血GSH-Px活力进行测定。

1.2 检测方法 ①血清学指标：所有受检对象与晨起空腹抽取静脉血3 ml，置于普通肝素管中，静置20 min，3 000 r/min离心10 min，取上层血清放置于-20 ℃冰箱中待测；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测视黄醇结合蛋白(RBP)、白细胞介素-4(IL-4)、免疫球蛋白E(IgE)，试剂盒购自上海晶美生物试剂有限公司，严格按照说明书操作规范进行；②哮喘控制测试(ACT)评分和痰EOS测定：ACT评分[5]根据患者自身情况如实填写各项分值，算出总分，痰液EOS检测参照支气管哮喘防治指南[4]计数方法测定，采用百分比表示。

2.5 统计学分析

3 结果分析

3.1 对小鼠耐缺氧能力和力竭游泳时间造成的影响

榆黄蘑制剂会对小鼠常压耐缺氧存活时间和力竭游泳时间造成不同影响，其具体情况见表1。

表1 榆黄蘑制剂对小鼠力竭游泳时间和常压缺氧存活时间的影响（±s）Tab.1 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on exhausted swimming time and survival time under normal pressure hypoxia in mice（±s）

注：*表示P＜0.05水平差异显著，**表示P＜0.01水平差异极显著。Note:*indicates that there is a significant difference at the level of P＜0.05,**indicates that there is a very significant difference at the level of P＜0.01.

组别 力竭游泳时间/min 常压缺氧存活时间/min低剂量组 28.46±2.51*9.95±1.36*中剂量组 30.17±4.71**高剂量组 36.21±5.66** 12.05±2.47**10.55±1.35**空白组 25.11±5.068.20±1.21

与两馆相比，进入国子监的要求就比较低，假冒比较简单，因此更加泛滥。德宗贞元十九年（803年），韩愈《请复国子监生徒状》中记载：“国家典章，崇重庠序，近日趋竞，未复本源。至使公卿子孙，耻游太学工商凡冗，或处上庠。 ”〔9〕(p589)太学中有工商子弟，这与“凡官人身及同居大功已上亲自执工商，家专其业，皆不得入仕”〔4〕(p34)的规定有悖。 说明德宗时，假荫在国子监中泛滥，甚至工商子弟都可以进入国子监。国家政策中规定进入学馆的条件已经完全被破坏，而真正贵胄子弟已不愿进入学馆学习。

3.2 对抗氧化作用的影响

将参与试验的小鼠分为对照组和榆黄蘑制剂3组，分别是低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组数目为30只，灌胃剂量分别为83 g·L-1、165 g·L-1和330 g·L-1，1次/d，持续35 d；使用等剂量的蒸馏水灌胃对照组小鼠。在最后1次灌胃0.5 h后，将小鼠放在宽27 cm、长32 cm的水槽中，水深为15 cm，小鼠在水槽中进行无负荷游泳，小鼠力竭游泳时间设置为小鼠头部进入水中8 s后没有再次抬头的时间，同时做好记录[4]。

由表2可知，与空白组比较，低剂量、中剂量、高剂量组的血清和肝脏中SOD值均升高，其中高剂量组升高最多（P＜0.01，P＜0.001），与对照组比较，中高剂量组的SOD值均升高。从表2的结果可以看出，与空白组比较，低剂量、中剂量、高剂量组的血清和肝脏中的MDA值分别降低了。中剂量、高剂量组的降低更为显著（P＜0.001）。对照组与空白组的SOD和MDA较低、中剂量组变化不明显。说明榆黄蘑饮料比红牛饮料可以显著加快自由基代谢，推迟疲劳的发生，减少组织中脂质过氧化的损伤，并有助于运动后疲劳的消除及物质与能量的恢复。

表2 榆黄蘑制剂对小鼠GSH-Px、T-SOD活力和MDA含量的影响（±s）Tab.2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on GSH PX activity,T-SOD activity and MDA content in mice（±s）

表2 榆黄蘑制剂对小鼠GSH-Px、T-SOD活力和MDA含量的影响（±s）Tab.2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on GSH PX activity,T-SOD activity and MDA content in mice（±s）

注：*表示P＜0.05水平差异显著，**表示P＜0.01水平差异极显著。Note:*indicates that there is a significant difference at the level of P＜0.05,**indicates that there is a very significant difference at the level of P＜0.01.

对照组 961.33±51.26 19.77±1.15低剂量组 1 047.58±79.21 19.53±2.64* 116.85±30.74*中剂量组 1 081.33±87.59 23.68±3.07* 95.62±5.97**GSH-Px/(U·mL-1)T-SOD/(U·mg-1)空白组 1 131.35±189.05 25.66±3.71 75.83±12.06 112.65±24.95组别 含量MDA/(nmol·mg-1)高剂量组 1 098.46±96.41 29.51±2.66**77.18±25.06**

采用SPSS 18.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以“±s”表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

4 讨论

灌胃结束0.5 h后，使用装有钠石灰的广口瓶将小鼠装好，并使用凡士林将瓶口密封严实。详细记录小鼠进入瓶中直到呼吸停止的时间，将这一时间认定为小鼠常压缺氧存活时间。

由表1可知，在对榆黄蘑制剂组小鼠灌胃35 d后，分析所得数据发现，小鼠的耐缺氧能力和力竭游泳时间随着灌胃剂量的增加得到增强，榆黄蘑高剂量组变化最大；榆黄蘑制剂组小鼠灌胃剂量的不同，也将会给小鼠常压耐缺氧的时间造成比较明显的影响，对高剂量榆黄蘑组和中剂量榆黄蘑组的影响最为明显。

机体在过度运动的时候，会发生缺氧情况，骨骼肌收缩需要的能量要借助糖酵解系统来实现快速的供应，从而产生许多乳酸。当乳酸进入到血液中以后，血液的酸碱度就会发生改变，会给骨骼肌细胞内的糖酵解过程造成一定的阻碍，从而使肌肉出现疲劳的状态，使机体的运动能力降低[9]。要想使机体的运动能力得到不断提高，使机体的疲劳感得到有效的缓解，就要对血乳酸的增长速度进行科学控制。小鼠在游泳停止后的50 min内是血乳酸的最佳恢复时间，该试验显示在这段时间里，血乳酸值有所下降，说明小鼠的疲劳感有所缓解[10]。

机体耐力的提高可以借助糖原的储备得以实现，使含氮化合物和蛋白质的分解代谢以及血清尿素氮的形成得到有效控制。体内氨基酸分解代谢的产物包括尿素氮在其中，肝脏是血中尿素氮的主要来源，随着尿液不断地排出[11]。分析可知使用榆黄蘑制剂组小鼠的血清尿素氮含量都比较低，低剂量组与空白组相比差异也非常明显，这就说明了榆黄蘑制剂可以对运动后小鼠的血清尿素氮形成起到较好的控制作用。

《刑法修正案八》将醉酒驾驶纳入到刑法处罚的范围是必然的，而且必须实现对该行为的全面监督，不能仅仅是以危险结果的发生为依据。我国目前已经在刑法中加入了危险驾驶罪，其中包括醉酒型危险驾驶罪，在具体的规定中，不需要考虑醉酒驾驶所造成的具体后果和情节，只要行为人存在醉酒驾驶的客观事实就构成该类犯罪，需要处以拘役以及罚金，因此需要对该罪名的犯罪构成要件进行研究，明确在何种情况下才能构成该类犯罪，这样才能更好地了解和研究醉酒型危险驾驶罪，并在实践中实现对社会安全的保护。

经过全面分析多糖类药理作用的构成关系发现，药理活性受多糖类水溶性的影响非常明显。榆黄蘑中提取的水溶性多糖具有较强的药理活性，可以使小鼠的耐缺氧能力和抗氧化能力得到提高。试验发现，榆黄蘑制剂可以使小鼠的抗疲劳、抗氧化和耐缺氧能力得到提高，为今后榆黄蘑制剂的推广奠定基础。

5 结论

小鼠抗疲劳试验结果表明，不同浓度的榆黄蘑制剂均可延长小鼠的负重游泳时间，增强小鼠血清的SOD活性，降低MDA的含量，提高蛋白巯基化合物，同时降低肝脏中蛋白羰基化合物。提高肝糖原、肌糖原的储备含量，这些说明榆黄蘑饮料具有很好的抗疲劳作用。