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长柄侧耳发酵液对小鼠肝脏组织抗氧化能力的试验分析*

2020-11-09

中国食用菌 2020年7期
关键词:侧耳发酵液食用菌

蒋 鸣

(江苏医药职业学院药学院,江苏 盐城 224500)

长柄侧耳(Pleurotus spodoleucas) 属于伞菌目(Agaricales) 侧耳科(Pleurotaceae) 侧耳属(Pleurotus),包含人体所需的基本营养元素和氨基酸等成分,人们在食用后其抗氧化作用可以显著提升机体对其他营养物质的吸收,在抵抗肿瘤方面同样具有显著的效果[1]。

侧耳属的大多数食用菌质地较好,味道可口,营养价值出众,具有良好的开发潜力。为了进一步探究长柄侧耳在免疫力增强和肝脏组织保护方面的功能,本次研究以食用菌发酵后获取的液体作为研究基础,以长柄侧耳菌种发酵作为研究切入点,探究其对于高胆固醇、高含量甘油三酯的预防作用,以便为今后的科学应用提供基础资料。

1 试验方法

1.1 试验材料

本次研究所选择的试剂材料包括长柄侧耳菌株、尿素氮、试剂盒、乙醇等。另外本次研究中的30只雄性小鼠全部购于四川大学医学院,平均体重约30 g。液体培养基由2.00%葡萄糖、1.00%蛋白胨、1.00%酵母浸粉和0.05%硫酸镁组成。研究所用设备包括离心机、超微粉碎机、电热水浴锅、小鼠饲养笼、小鼠游泳池、旋转蒸发仪等。

1.2 试验步骤

1) 试验内容

在锥形瓶中装入液体培养基,高温灭菌并接种长柄侧耳菌株后,在30℃培养箱中得到液体菌种。将液体菌种于200 r·min-1的培养箱中培养5 d,过滤后获取长柄侧耳菌株发酵液。

选择30只健康雄性小白鼠,将其中20只按照服用剂量的差异划分为高剂量组和低剂量组,另外10只作为对照组,只喂食蒸馏水。高剂量组每日灌胃长柄侧耳发酵液30 mg·kg-1,低剂量组每日灌胃发酵液 10 mg·kg-1,对照组每日灌胃蒸馏水 10 mg·kg-1,持续时间均为30 d。

在小鼠30 d最后一次灌胃结束后,将其尾部挂上5%体重重量的金属块,并将其放入游泳试验箱中游泳。水温30℃,水面高度0.5 m,观察小鼠的游泳情况。若小鼠水下游泳时间超过5 s,则做好记录。

小鼠最后一次灌胃结束后,还需要进行爬杆力量试验。若小白鼠因肌肉疲劳导致爬杆时出现掉落情况,记录开始爬杆和掉落的持续时间。

耐缺氧试验需在广口瓶中放入石灰,后将小鼠依次放入瓶中,密闭瓶口,不断晃动广口瓶,记录小鼠从放置入瓶到死亡的最终时间。

2) 测定内容

运动试验结束后分离小鼠血清,测试其中的肝糖原储存量;眼球取血测试血乳酸含量,同时测试尿素氮的含量。之后取新鲜的肝组织测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA) 与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 活力。

1.3 统计学分析

研究中的所有数据全部采用SPSS 22.0统计学软件进行分析,其中计量资料以(±s) 表示,组间结果比较选择t进行检验,以P<0.05时判定数据差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 抗氧化能力研究

抗氧化能力试验指标见表1。

表1 3组小鼠试验后各项指标数据统计Tab.1 Statistics of various indicators after the three groups of mice

由表1结果显示,3组小鼠在肝糖原、尿素氮、血乳酸、SOD、MDA和GSH-Px几项指标方面具有显著的差异(P<0.05),充分说明了高剂量组小鼠的抗氧化能力强于低剂量组和一般对照组,即长柄侧耳发酵液含量越高,小鼠的抗氧化能力越强。

2.2 抗运动疲劳能力研究

3组小鼠抗运动疲劳能力试验结果见表2。

表2 运动时间数据结果Tab.2 Results of exercise time data

由表2所示,在抗运动疲劳能力方面,高剂量组小鼠在游泳时间、耐缺氧时间和爬杆时间3项指标显著优于低剂量组小鼠和对照组小鼠(P<0.05),说明高剂量组小鼠的整体运动时间变得更长,无论是在游泳还是爬杆的过程中都具有良好的运动耐力,进而使得其耐缺氧能力时间加长。

3 讨论

现代人群对于健康的重视程度越来越高,与食用菌相关的研究工作也在不断深入。特别是信息时代,人们获取健康资源的途径增加,可以深入了解食用菌相关知识,更促进了食用菌的开发和利用。食用菌不仅具有明确的营养价值,还具一定的药理活性,在疾病预防方面效果显著,符合现代人群的健康发展理念,也具有较大的市场潜力。

当前野生食用菌在市场上出现了供不应求的现象。而为了保持生态平衡,如何有效地开发新类型资源和利用现阶段食用菌的生物学特性,从中筛选出质量较好的菌种类型,从其发酵产物中得到活性成分等研究,也成为了今后工作的重点内容。

在长柄侧耳的相关研究中,已经证实了其发酵产物能增强小鼠的机体免疫力,在抗肿瘤方面也起到了较好效果,可以在一定程度上抑制肿瘤的生长。如在邓西贝[1]的研究中提到肿瘤的产生和发展过程,常伴随着机体免疫系统被破坏后免疫力降低的情况,而胸腺指数的增加即表明机体免疫力的提高;小鼠在食用长柄侧耳发酵液和菌丝后,其胸腺指数显著增加,小鼠免疫力有所增强,而小鼠T细胞与B细胞增殖能力也得到提升,再次证明了长柄侧耳发酵液和菌丝在免疫力提高方面起到的作用对小鼠机体免疫细胞的良性影响。

研究结果也证实,长柄侧耳发酵产物可以被用于相关的保健品开发工作中。或以此为基础制造辅助肿瘤治疗的药物,结合现有动物试验,进一步明确其抗肿瘤活性。

另外还有研究提出长柄侧耳对于高脂血症、高血糖等也具有良好的控制效果。谢兆莉[2]等的研究中,连续灌胃45 d长柄侧耳发酵液后,灌胃给药的小鼠血清当中的胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量优于一般小鼠。从这个角度看,可以在相关人群的治疗过程中开发研究应用其发酵产物的价值。

如现代人群中,喜甜食和喜油脂饮食人群占大多数,而其对于长柄侧耳等菌类食品可降低血脂功效认识不足。因此,应该在相关的药物研发工作中,加强对食用菌产品的开发工作,加大食用菌营养价值和保健价值的宣传,促进其产业的发展和健康产业的开发。相比于香菇等常见食用菌,长柄侧耳菌丝培养难度较低,且不容易出现染菌现象,可以通过工业化手段大规模生产,提供环保健康的绿色食材。

在李灿[3]等的研究中,通过长柄侧耳胞外多糖分离纯化方法证实了其对糖尿病小鼠的降血糖作用,在合理的剂量下有调节糖代谢、降低血糖并改善糖尿病症状的作用。据此试验结果,可证实长柄侧耳胞外多糖的药理活性作用,进一步促进其保健价值的开发。

从现有研究中已了解到长柄侧耳在疾病治疗保健方面的应用价值,但长柄侧耳在肝脏组织抗氧化方面的作用也不容小觑。对于人体而言,要想避免身体机能快速老化失去运动能力,最重要的就是让肝脏始终保持活力。

肝脏可以产生身体活动所需要的能量,提高机体抵抗力。但肝脏极易消耗氧气,且容易产生大量自由基,当肝脏清除自由基的能力不足时,就会导致肝功能下降[4-5]。现代科学有关抗衰老和抗氧化的理论中,越来越多的研究也证实人体衰老与多种疾病的产生与自由基形成之间具有密切联系。且自由基的危害作用还涉及肌肉的生理活性和疲劳的产生,因此可以抑制自由基产生而起到抗氧化作用。

试验结果中,3组小鼠在肝糖原、尿素氮、血乳酸、SOD、MDA和GSH-Px几项指标中均具显著的差异。说明高剂量组小鼠的抗氧化能力强于低剂量组和一般对照组,即食用菌酵液含量越高,小鼠的抗氧化能力越强。在抗运动疲劳能力方面,高剂量组小鼠在游泳时间、耐缺氧时间和爬杆时间3项指标上显著优于低剂量组小鼠和对照组小鼠。说明高剂量组小鼠的整体运动时间变得更长,无论是在游泳还是爬杆的过程中都具有良好的运动耐力,进而使得其耐缺氧能力时间加长。

尽管本次研究的结果只提供了一定的参考指导,但是对于今后的食用菌保健应用领域来说,也为其提供了更为丰富的理论基础。今后的研究设计也应考虑如何最大限度地发挥食用菌发酵液的抗疲劳、抗氧化与其他保健作用优势。综上所述,长柄侧耳发酵液可以提升小鼠的肝脏组织抗氧化能力,在抗运动疲劳方面也能起到稳定的效果,据此可进行深层研究,以开发其潜在的药理活性。

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