杨嘉琪

广东省惠州市质量计量监督检测所 广东惠州 516003

磺胺类药物（SAs）通常应用于防治鸡内球虫病、肝炎、白痢等疾病，但因为SAs 在动物体内存在的时间比较长，若服药不当会造成鸡蛋中SAs 的药物残留，直接影响到人类的健康。近年来，我国逐渐加强了对动源食品中这类药物残留的监控，该抗生素在被畜禽动物食用后，会在其肾脏、鸡蛋中发现残留，通过建立鸡蛋中抗生素残留的检测方法，能有效提升家禽动物食品质量的控制水平。当前，国内外对动物源性食品中磺胺类药物残留的检测方法有气相色谱法、微生物法及高效液相色谱法等。鸡蛋作为生活必需品，研究报道主要应用液相色谱串联质谱法进行检测，其稳定性强，能满足鸡蛋中磺胺类药物残留的检测标准。

1 实验部分

1.1 试剂与耗材

磺胺乙酰、磺胺噻唑、磺胺甲恶唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、

磺胺二恶唑、磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲氧哒嗪、磺胺吡啶、磺胺地索辛、磺胺喹恶啉，德国DR.E 公司。甲醇、乙腈、甲酸等，为色谱纯（国药）。应用甲醛把标准品配制单标溶液，保存在-20℃的环境下。鸡蛋经液质分析为阴性样本[1]。

1.2 仪器设备

ACQUITYTM 型液相色谱仪、ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱（2.1mm×100mm，1.7μm），美国 Waters 公司；纯水仪；氮吹仪；离心机。

1.3 试验

1.3.1 样品前处理方法

本实验通过1%的甲酸乙酸提取空白鸡蛋样本，并进行溶剂优化试验；对涡旋震荡提取、涡旋振荡+超声配合提取进行对比，对比加入10g 无水硫酸钠对结果的影响，最终确定最佳的前处理条件[2]。

1.3.2 样品后处理方法

选择2g 样品，置于无水硫酸钠10g、混合内标工作液100ng，12ml 的 甲 酸 乙 腈，超 声 提 取10min；7000rpm 离 心5min，60℃水浴氮进行净化，并加入2ml 流动相复溶，取下层溶液0.222μm 滤膜上机检测。

1.3.3 液相条件

色谱柱：A cquity UPLC BEH C18（100mm×2.1mm，1.7μm）；2mmol 乙酸铵 -0.1% 甲酸（流动相 A）；乙腈（流动相B）。

1.3.4 质谱条件

毛细管电压1.2kv；RF 透镜电压：50V；脱溶剂温度：600℃；电离子模式：ES+；碰撞气流速：0.15mL/min；锥孔气流速：150L/h；各种药物优化母离子和子离子及对应聚焦电压和碰撞电压值，如表1 所示。

1.3.5 方法线性和灵敏度试验

试验应用空白鸡蛋样品，用1.32 方法处理，在1.0-50μg/kg浓度范围内添加不同梯度磺胺类药物混标溶液，同时把处理好的空白鸡蛋样品稀释至标准溶液。

1.3.6 方法的回收率试验

实验选取空白鸡蛋液样品，其浓度主要为2.0、10.0、25.0μg/kg 等不同水平的混标溶液，根据方法开展回收试验，应用测定回收率及RSD 对方法的精准度进行评估。

表1 磺胺类药物的监测离子、保留时间及质谱参数

2 结果与讨论

本次研究结果显示：在16 种磺胺类药物的回收率介于75.51%-124.21%，RSD 介于0.07%-14.91%，表示该方法精密度与准确度均能满足鸡蛋中磺胺类药物的检测标准。检测准确性在仪器检测中至关重要，而前处理方法是仪器检测中的重要环节。当前我国尚未明确规定鸡蛋中磺胺类药物的残留限度，通过对鸡蛋样品的实际检测，得出该方法适用于检测鸡蛋样品中磺胺类药物的残留量[3]。本文通过与优化提取剂、提取方法等，创建了鸡蛋中磺胺的UPLC-MS-MS 检测方法。该方法的样品经过振荡及超声混合提取取得了显著的净化效果，并使用超高效液相色谱串联质谱对其进行检测。这种方法具有极高的灵敏度、稳定性，能满足鸡蛋中磺胺类药物残留的检测要求，为禽蛋中磺胺类药物检测提供了有效参考。