徐雪雪， 王春玲， 马明阳， 陈思锦， 田万年*

(1. 吉林农业科技学院动物科技学院，吉林 吉林 132101； 2. 吉林省永吉县黄榆乡畜牧兽医站，吉林 永吉 132223)

羊泰勒虫病是由泰勒属(Theileria)的多种原虫引起羊的血液原虫病[1]。该病可通过蜱传播，羊被携带虫体的蜱叮咬后，虫体由血液侵入羊体内并寄生在巨噬细胞、淋巴细胞、红细胞中进而引发病理现象。我国已报道能够感染羊的泰勒虫分别为吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫，其中吕氏泰勒虫作为国内的优势虫种分布范围广且危害最大[2]。本病危害严重，外地引进羊发病率较高，慢性发病羊生长发育变缓，产肉量和产毛量显著下降，给养羊业造成重大经济损失[3]。为了解吉林市左家镇羊泰勒虫优势虫种及感染情况，本试验应用血液涂片镜检结合PCR方法对采自吉林市左家镇4个村的绵羊血液样品进行羊泰勒虫检测，为相关防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 血液样品无菌采集左家镇马虎头村、大官地村、黄花村、河湾子村饲养的绵羊抗凝血样品278份，用于相关项目检测。

1.2 主要试剂及仪器血液DNA提取试剂盒(上海生工生物工程有限公司)、DNA 2 000 Marker[宝生物工程(大连)有限公司]、琼脂糖(上海生工生物工程有限公司)、PCR仪(百泰克生物技术有限公司)。

1.3 血液涂片染色镜检制作血涂片，滴加甲醇固定，放入装有吉姆萨染液的染缸中，室温染色6 h，然后取出血涂片用蒸馏水冲洗，自然晾干后显微镜检查羊泰勒虫体。

1.4 分子生物学检测

1.4.1 基因组DNA提取将采集的绵羊抗凝血按照血液基因组DNA提取试剂盒说明书程序提取全血基因组DNA，-20 ℃保存备用。……