HPLC法测定芍药花瓣中紫云英苷的含量
2020-10-23李洪芹马昌豪王泽海罗盼生
李洪芹,马昌豪,王泽海,罗盼生*
(1.菏泽学院,山东 菏泽 274015;2.菏泽市食品药品检验检测研究院,山东 菏泽 274015)
芍药(PaeonialactifloraPall.)是毛茛科芍药属多年生宿根草本植物,原产于东南亚,其根可以入药,是中药材白芍和赤芍的重要来源,具有重要的药用价值,同时具有较高的观赏价值[1]。菏泽作为芍药的四大主产区之一,具有悠久的种植历史,其品种多、花色丰富、花型多变。相关文献[2-4]研究表明芍药富含黄酮、单萜类、三萜及甾体类化合物,此前研究多集中芍药的根中的各类成分和药理作用,并未对花瓣的质量情况进行研究,在前期对芍药花瓣的指纹图谱研究基础上,采用高效液相色谱法对芍药花瓣中的紫云英苷含量进行测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器
岛津LC-2030高效液相色谱仪、XS-105电子天平(梅特勒公司)、FRQ-1006HT超声波清洗器(杭州法兰特)
1.2 试药
紫云英苷(批号:CIV-471295、纯度为98.96%)购于斯坦福标准物质,乙腈(色谱纯,默克化工)、磷酸(色谱纯,天津科密欧)。
1.3 样品
样品来自于菏泽曹州牡丹园,经菏泽市食品药品检验检测研究院罗盼生主任医师鉴定为毛茛科植物芍药的花瓣。
2 方法与结果
2.1 方法学验证
2.1.1 色谱条件
色谱柱:Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)。
流动相:以乙腈为流动相A,0.1%磷酸水溶液为流动相B,按照表1进行梯度洗脱。

表1 梯度洗脱
检测波长:347 nm,流速:1 mL/min。理论塔板数按紫云英苷峰计算,应不得低于3000,结果见图1。

图1 HPLC色谱图
2.1.2 供试品溶液制备
称取芍药花瓣粉末(新鲜花瓣,50℃干燥至恒定重量,粉碎,过3号筛)1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入65%乙醇50 mL,称定重量,超声处理30 min(功率250 W,频率40 kHz),冷却至室温,用65%乙醇补足失重,滤过,取续滤液,即得。……
