Cu2+改性SBA-16固定化漆酶的研究
2020-10-23夏峰
夏 峰
(南京医科大学康达学院,江苏 连云港 222000)
酶作为一种生物大分子催化剂,具有高效、专一、温和、绿色等特点,在各个领域被广泛应用,并且被逐步提高到战略应用的高度[1-2]。虽然酶具有如此优越的性能,但游离酶的使用经常受到环境的限制,稳定性不好且不能重复使用,而将酶固定化后则可以将酶有效地从反应体系中分离出来,从而提高酶的稳定性并可多次使用[3-5]。漆酶是一种单电子氧化还原酶,含有四个铜离子且铜离子是其活性中心的重要组成部分,稳定性较好,底物专一性宽泛,在有机药物、生物传感器、废水处理等邻域被广泛应用[6-9]。作为催化剂的载体,介孔分子筛具有较大的比表面积和孔容,是一种非常有前途的固定化酶载体[10],与SBA-15和MCM-41相比,SBA-16是一类孔道规整,具有超大笼状的 Im3m型体心立方结构材料[11],其较厚的孔壁、高的比表面积和热稳定性,尤其是其三维孔道的连通性更有利于物料的传输及反应物及产物的扩散,使得SBA-16在催化、吸附、分离和生物大分子的固定等方面有着良好的应用前景。本文以SBA-16为载体,用铜离子对其进行改性,然后通过吸附漆酶制备了一种固定化漆酶,结果显示,Cu/SBA-16固定化漆酶的活性与Cu2+负载量呈现出一定的正相关性。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
微量天平,摇床,pH计,Biomate 3S紫外分光光度计,离心机。
1.2 试剂
漆酶,SBA-16分子筛,乙酸铜,Na2HPO4·12H2O,NaH2PO4·2H2O, 2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(简称ABTS)。
2 实验方法
2.1 Cu/SBA-16制备
称取五份0.1 g的SBA-16,分别悬浮于10 ml Cu2+浓度为10、20、30、40、50 mmol/L的乙酸铜水溶液中,室温下浸渍24 h,然后过滤,去离子水洗涤,干燥得到蓝色样品,记为Cu/SBA-16。……
