广东省佛山市第一人民医院（528000）禤洁甜 伍启康

随着社会上晚婚晚育的趋势日趋明显以及近年二胎政策的全面开放，年龄大于35岁的孕妇比例明显增加，年龄因素对卵子的染色体有着明显的负面影响，为了减少一些染色体异常的婴儿出生，2010年我国卫生部推出的《胎儿染色体异常的细胞遗传学产前诊断技术标准》中明确要求预产期年龄大于或等于35岁的孕妇应进入产前诊断[1]。本文将来我院进行产前染色体核型分析的3193例高龄孕妇资料进行整理分析，了解高龄孕妇胎儿染色体异常的发生情况，为临床遗传咨询提供参考数据，现将统计数据报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料 2006年1月～2018年10月到广东省佛山市第一人民医院细胞遗传室进行胎儿染色体检查者，共3193人。进入产前诊断的原因首先是预产期年龄大于35岁，有个别孕妇合并有B超异常、唐筛高风险、夫妇有一方染色体异常、无创DNA检测提示异常、不良生育史、羊水过多过少等。

1.2 方法 孕妇在知情同意并签署知情同意书后，行羊膜腔穿刺术，在超声引导下，抽取20ml左右的羊水，分两个无菌离心管装，1500r/min离心8～10min，将沉淀的细胞分别接种于羊水培养基中，置于37摄氏度、5.5%CO2的培养箱中静置培养6天后开始观察，当羊水细胞贴壁生长旺盛，倒置显微镜下见多个细胞克隆时，即可收获细胞。按照ISCN1995标准，油镜下计数20个细胞，分析5个以上核型，发现嵌合体时加大计数和分析100核型（若总的核型不足100个，则视可分析的核型数量而定）。

1.3 孕妇在知情同意并签署知情同意书后，在超声引导下，经腹部抽取脐血1～2ml（以血红蛋白电泳方法鉴别是否污染母亲血），注入无菌肝素锂抗凝管，分别接种在两瓶外周血淋巴细胞完全培养液中，置于37摄氏度培养68～72小时后收获，制片及核型分析过程同羊水。

1.4 孕妇在知情同意并签署知情同意书后，在超声引导下，经腹部抽取绒毛组织1～2枝，无菌操作下剪碎绒毛组织，胰酶消化10～15分钟，加入培养基培养5天后观察，当绒毛细胞贴壁生长旺盛，倒置显微镜下见多个细胞克隆时，可加入秋水仙素2～4小时后收获细胞，制片及核型分析过程同羊水。

1.5 随访 全部病例由专人跟踪随访至产后6个月。

2 结果

3193例高龄孕妇染色体核型分析结果中，染色体异常99例，异常率3.1%，包括非整倍体83例（83.8%），其中21-三体60例（60.6%）、18-三体13例（13.1%）、1 3-三体5 例（5.0%），4 7,X.Y.例（4.0%），47,XYY 1例（1.0%）；结构异常16例（16.2%），其中易位13例（13.1%），45,X[27]/46,X,i(X)(q10)[35]1例（1.0%），46,XN,tas(20;21)(pter;qter)1例（1.0%），46,XN,der(7)dup(p22.1pter)；der(9)del(9)(p22.3)1例（1.0%）。见附表。

3 讨论

本研究数据显示，3193例高龄孕妇胎儿染色体核型分析结果中异常染色体核型99例，异常率3.1%，略低于其他地区高龄孕妇胎儿染色体核型的异常率[2][3]。其中非整倍体83例，涉及的染色体包括13、18、21、X、和Y，占异常总数的83.8%，非整倍体中21-三体60例（60.6%），发生率最高；有文献表明，绝大多数非整倍体是母源性的，发病率与孕妇高龄有关[4]，随着女性生育年龄增大，胎儿染色体异常的发生率增加，而且以染色体非整倍体异常发生率较高[5][6]，与本研究中染色体非整倍体异常率较高一致。以上异常者均行详细遗传咨询，性染色体异常者除了一例47,XYY综合征选择继续妊娠外，非整倍体的胎儿全部选择终止妊娠。

本研究组有15例结构异常的病例，12例非同源染色体发生平衡易位，经进一步验证检查，发现11例来源于父母，1例为新生易位；1例发生在20和21号染色体发生末端相接亦为新生结构异常，上述两例新生的染色体结构异常病例胎儿宫内发育正常，超生检查正常，遗传咨询时已向孕妇详细说明遗传效应及可能存在的风险，孕妇知情后选择继续妊娠，出生后外观表型正常，目前生长发育正常，并密切随访；有1例因有不良孕产史进入产前诊断的绒毛染色体核型为46,XX,t(7;9)(p15;p21)，同期超声检查未见异常，进一步检查发现，母亲核型为46,XX,t(7;9)(p15;p21)，7号与9号染色体平衡易位携带者，表型智力正常，已育有一正常九岁男孩，孕20周时进行羊水染色体核型分析并同时进行CMA的检测，CMA检测结果提示胎儿存在7号染色体部分重复以及9号染色体部分单体，同期B超检查结果发现心脏、肾脏等多个脏器畸形，胎儿的染色体核型分析报告在结合超声检测报告及CMA的结果后发出的核型为46,XN,der(7)dup(p22.1pter),der(9)del(9)(p22.3)的报告，孕妇在接受遗传咨询被告知胎儿会出现多发畸形建议引产的情况下仍坚持选择继续妊娠。新生儿于2018年7月孕40周+5顺产一女婴，超声提示左肾异常回声，考虑左肾多囊性发育不良；下肢X线检测双侧扁平足改变、脑CT、肝胆脾超声等未见异常；体格检查发现硬腭、软腭Ⅱ度裂，肛门息肉，肌张力稍低等，这病例还在密切跟踪随访。染色体平衡易位携带者表型及智力发育一般正常，但在减数分裂时，因染色体的联会与交换，会产生18种配子，与正常的配子受精后，会形成18种类型的合子，但只有1/18是正常，1/18为表型正常的平衡易位携带者，其他16种均不正常；罗氏易位携带者会产生6种配子，与正常的配子受精后，会形成6种类型的合子，但只有1/6是正常，1/6为表型正常的平衡易位携带者，其他4种均不正常，上述两种染色体易位均会导致反复流产、死胎和胎儿多发畸形等[7]，因此对于夫妇其中一方为染色体结构异常携带者的病例，在遗传咨询过程中须告知孕妇相关风险，劝其积极进入介入性产前诊断。虽然传统的细胞培养染色体核型分析技术至今仍然是诊断染色体畸形的金标准，但随着分子遗传学诊断技术的广泛应用，建议同时进行胎儿分子遗传学检测，两种方法联合诊断，排除胎儿染色体微缺失或微重复综合征，并可提高诊断的准确率[8][9][10]。

附表 3193例高龄孕妇胎儿染色体异常核型

综上所述，染色体非整倍体的发生在常见的5条染色体上，分别为13、18、21、X、和Y，其中以21-三体的发生率最高；染色体结构异常主要源于父母，因此夫妇其中一方为染色体结构异常携带者，建议直接进入产前诊断，有条件的地区应同时送检分子遗传学的诊断，尽早发现染色体异常胎儿，及时终止妊娠，预防出生缺陷。