黑曲霉β-甘露聚糖酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达
2020-10-12章亭洲王碧娇林路成徐志伟陆梦甜易蒲红吴石金
章亭洲,王碧娇,林路成,徐志伟,陆梦甜,易蒲红,吴石金
(1.浙江科峰生物技术有限公司,浙江 海宁 314400;2.浙江工业大学 生物工程学院,浙江 杭州 310014)
β-1,4-D-甘露聚糖酶[β-1,4-D-mannan mannanohydrolase,EC 3.2.1.78],简称β-甘露聚糖酶(endo-1,4-β-mannanase),可以随机水解甘露聚糖中的β-1,4-D-甘露吡喃糖苷键。β-甘露聚糖酶在食品、医药、饲料、纺织、纸浆漂白及能源开发等领域和行业都得到应用,用途十分广泛。β-甘露聚糖酶在多种生物中均存在,包括动物、植物、微生物等,在不同物种中活性差别较大[1-3]。其中微生物来源的β-甘露聚糖酶不仅可以工业化发酵生产并高效分离纯化制备,还具有活性高、成本低等显著优点,已引起高度的关注和开发应用[4-7]。例如在饲料加工生产中,甘露聚糖等非淀粉多糖是一组不易被动物利用的碳水化合物。β-甘露聚糖酶具有一般非淀粉多糖酶类的作用,因此,可以作为一种新型的酶制剂应用于饲料原料加工,用于消除饲料中甘露聚糖等不容易降解的多糖类,可提高谷物、饼粕类原料的消化能,节约资源[8]。β-甘露聚糖酶还可以促进动物类胰岛素生长因子IGF-I的分泌,因此可以作为一种多功能的促生长剂,促进纤维素的消化、能量吸收和蛋白合成,提高瘦肉率[8]。此外,甘露聚糖分解后可以产生动物益生元功效物质甘露寡糖,不仅可以促进肠道内有益菌群的形成,还可以调节机体免疫系统,提高动物免疫力,从而降低发病率[9]。
甲醇营养型毕赤酵母(Pichiapastoris)表达系统具有表达效率高、外源基因遗传稳定和可高密度培养等优点,已成为优良的外源蛋白的真核表达宿主。……
