王娟 郑爱义 鲍海平

[摘要]目的 测定白细胞介素-21（IL-21）和CC趋化因子配体20（CCL20）在2，4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的特应性皮炎小鼠模型中的表达情况，探讨二者在特应性皮炎发病中的作用。方法 将12只BALB/c雌性小鼠，随机分为模型组和对照组，每组6只，使用DNCB构建小鼠特应性皮炎模型。造模成功后采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中IL-21和CCL20的水平。结果 特应性皮炎模型组小鼠血清中IL-21和CCL20的表达水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），并且二者表达成正相关（r=0.59，P<0.05）。结论 IL-21和CCL20在特应性皮炎小鼠模型中表达升高，且成正相关，可能协同参与了特应性皮炎的发生发展。

[关键词]特应性皮炎;白细胞介素-21;CC趋化因子配体20;小鼠模型

[中图分类号] R751          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2020）8（b）-0014-03

[Abstract] Objective To detect the expression of interleukin-21 （IL-21） and CC chemokine ligand 20 （CCL20） in 2，4-dinitrochlorobenzene （DNCB） induced mice models with atopic dermatitis and explore their roles in the pathogenesis of atopic dermatitis. Methods Twelve female BALB/c mice were randomly divided into the model group and control group（6 in each）. Mice models with atopic dermatitis were established by DNCB. After successful modeling， the serum levels of IL-21 and CCL20 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）. Results The serum levels of IL-21 and CCL20 in the model group with atopic dermatitis were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. There was a positive correlation between the serum levels of IL-21 and CCL20 in the model group（r=0.59， P<0.05）.Conclusions The expression of IL-21 and CCL20 in the mouse model of atopic dermatitis is increased and positively correlated， which may be synergistically involved in the occurrence and development of atopic dermatitis.

[Key words] Atopic dermatitis; Interleukin-21; CC chemokine ligand 20; Mouse model

特應性皮炎（AD）是由多种免疫、炎性细胞和细胞因子参与的慢性炎症性皮肤病，皮损顽固难愈，病因和发病机制较为复杂，与遗传、免疫异常、皮肤屏障受损、生存环境和感染等因素有关[1]。不同亚型CD4+T细胞介导的免疫失衡是AD发病的重要环节[2-3]。白细胞介素-21（IL-21）是IL-2家族中重要的多效能细胞因子，可调节淋巴细胞和自然杀伤（NK）细胞的增殖分化，广泛参与体内免疫应答和炎性反应。CC趋化因子配体-20（CCL20）是CC亚族的趋化因子，可趋化表达CC趋化因子受体（CCR）6的淋巴细胞和未成熟树突状细胞向抗原局部定向迁移，与多种自身免疫性疾病有关。本研究通过测定AD小鼠模型血清中IL-21和CCL20的表达变化，探讨二者在AD发病中的作用。

1材料与方法

1.1实验动物与主要试剂

无特定病原体动物（SPF）级7～8周龄健康BALB/c雌性小鼠12只，动物合格证号SCXK（京）2015-0006，由山西大同大学动物实验中心提供。2，4-二硝基氯苯（DNCB）购自美国Sigma公司，小鼠IL-21、CCL20酶联免疫吸附法（ELISA）检测试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技有限公司。本研究已通过本院医学伦理委员会的审核批准。

1.2方法

1.2.1实验动物造模  12只BALB/c小鼠清洁级实验室饲养1周，适应环境后开始实验，随机分为模型组和对照组，各6只。参考文献[4-5]构建AD小鼠模型，实验前剃除小鼠背部毛发，面积约3 cm×2 cm。模型组小鼠第1～3天背部剃毛区外涂100 μl 1%DNCB溶液（采用丙酮∶橄榄油=1∶3作为基质配制），第4天继续外涂100 μl 0.1%DNCB溶液，改为每间隔1 d外涂1次，直到第28天涂抹后造模完成。造模后小鼠背部皮肤增厚，可见明显红斑、丘疹、丘疱疹、渗出、堆积大量痂屑。对照组小鼠背部剃毛区仅外涂基质，涂抹剂量、间隔时间与模型组相同。

1.2.2皮肤组织病理检查  造模后，无菌条件下两组小鼠背部剃毛区皮肤组织取材，10%甲醛溶液固定、脱水、透明、石蜡包埋、切片染色、封片，镜下观察两组小鼠皮肤组织病理改变。

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（收稿日期：2019-12-13）