王希越，王洪伟，王月，石一雯，连丽丽，娄大伟

(1.吉林化工学院 化学与制药工程学院，吉林 吉林 132022；2 吉林省中北化工工程设计有限公司，吉林 吉林 132000)

目前，石化能源的日益枯竭及环境污染问题备受关注[1]，生物柴油是一种可替代传统石油的可再生生物清洁能源，具有良好的环保性能，安全、可再生及可降解等特点，目前生物柴油的开发已成为国际新能源研究的热点[2-3]。

生物柴油利用各类油脂与短链醇经过油脂酯化或者酯交换转化而产生[4-5]。其原料来源较多，其中微生物油脂，如酵母菌、微藻具有培养简单、生长速度快、油脂含量高特点，是理想的油脂原料[6-8]。目前酵母菌被当作油脂原料的相关报道还比较少。本文以酵母菌为原料，通过气相色谱质谱联用仪对酵母菌为原料制备生物柴油的工艺方法进行研究。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

正己烷、甲基叔丁基醚、甲醇均为色谱纯；氯仿、氯化钠、氢氧化钾均为分析纯。

7890B气相色谱仪；M7-300EI质谱仪；H1650离心机；XW-904微型漩涡混合仪；HH-2数显恒温水浴锅；BXM-30R立式压力蒸汽灭菌器；BSD-YX3200智能精密摇床；N-EVAP111氮吹仪。

1.2 GC-MS条件

1.2.1 色谱条件 色谱柱Agilent HP-5(30 m×0.32 mm×0.25 μm)；进样口温度260 ℃，程序升温条件：初始柱温150 ℃，20 ℃/min速率升到214 ℃，保持5 min，再以10 ℃/min速率升到280 ℃，保持 5 min，分流比10∶1，载气为氦气(纯度99.999 5%)，流速1.2 mL/min，总流量16.20 mL/min，进样量1 μL。

1.2.2 质谱条件 电子轰击离子源能量70 eV，离子源温度230 ℃，传输线温度280 ℃，溶剂延迟时间2 min，扫描模式为SIM(选择离子扫描)。

1.3 样品制备

1.3.1 酵母菌培养 从琼脂平板上挑取单菌落到装有10 mL的YPD液体培养基中，放到摇床中，在30 ℃、200 r/min条件下，活化培养12 h。……