王智慧 张红梅 高鸿蒙

摘要：在我国内蒙古锡林郭勒盟地区富有大量的野生狭叶荨麻草，在当地民间称之为哈拉海（蒙语），此草富含人体黄酮类化合物。为了解锡林郭勒盟此草中黄酮化合物的最佳提取条件，所以本实验采用不同的料液比、乙醇浓度、温度及时间四个因素对其进行提取比较分析，以此来确定最佳提取条件。试验得出最佳提取条件：料液比1：30、乙醇浓度为百分之五十、温度为六十度、试验时间为五小时，在这样的条件下统计出提取率到达82.5%。

关键词：锡林郭勒盟；哈拉海；荨麻草；黄酮

哈拉海是荨麻草的蒙语称法，属于荨麻科，是一种一年或多年生长的野生草本植物。在我国大概发现了十六例样本，大多数是裂叶荨麻、宽叶荨麻等，广泛分布在我国的西北地区、西南地区及少量的东北、华北地区，我国富有大量的荨麻草资源。这种植物也是民间常用的药材，被广泛应用，称之为民族药，是我国中医药的一种，源远流长的中医荨麻药早在古典书籍《本草纲目》中有所记载，此药富含蛋白质、黄酮等营养物质，对肝肾功能、消化功能具有良好的治疗效果。

我国在近些年一直对荨麻草进行研究，许多专业技术研究者通过对荨麻草草根的研究发现，荨麻草草根富含大量黄酮、有机酸、化合物及蛋白质等。王亚丽等相关研究者对其研究发现狭叶荨麻根、茎、叶的乙醇提取物和水提取物都有抗炎消痛的作用。本实验对锡林郭勒盟野生哈拉海中黄酮类化合物的提取进行研究，能够使当地的资源得以加工利用及合理开发，从而达到一定的经济效益，并为医学研究提供科学依据，也为药物的加工业发展提供依据。

1. 材料与方法

1.1 材料、试剂与仪器

材料：锡林郭勒盟野生哈拉海。这一材料所采集的地方为锡林浩特市的附近，整体先进行清洗，洗干净之后做烘干工作，然后将其进行粉碎处理。

石油醚：AR级，深圳市南山区恒泰丰化工公司；无水乙醇、95%乙醇；AR级，天津致远化学试剂有限公司。

7230G紫外分光光度计：上海青华科技仪器有限公司；RE52-AA旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂。

1.2 试验方法

1.2.1 哈拉海黄酮类化合物的提取工艺过程

过程大致可以分为八个部分：

① 首先需要称取适量的哈拉海粉末，重量为10.00g。

② 接着需要进行过滤，这也是非常重要的一个环节，采用的方式为醇回流过滤。

③ 过滤之后，开始做减压工作，使其成为浓缩的状态。

④ 为石油醚萃取。

⑤ 醇沉。

⑥ 需要再进行一次减压浓缩的工作内容。

⑦ 定容。

⑧ 对吸光度进行检测和评定。

1.2.2 哈拉海黄酮类化合物提取的单因素试验

① 不同料液比试验

首先，需要选择五个相同量度的三角瓶，都是500毫升，每个瓶内都加入相同量度的哈拉海粉末，为10.00g，其次，分别加入50%乙醇，加入乙醇的量度是不同的，分别是100mL、200mL、300mL、400mL、500mL，经过五个小时之后，最后做检测工作，对吸光度进行评定。

② 不同乙醇浓度试验

首先，需要选择五个相同量度的三角瓶，都是500毫升，每个瓶内都加入相同量度的哈拉海粉末，为10.00g，其次，分别加入300毫升乙醇，加入乙醇的浓度是不同的，分别是0、20%、40%、60%、80%，经过五个小时之后，最后做检测工作，对吸光度进行评定。

③ 不同浸提温度试验

首先，需要选择六个相同量度的三角瓶，都是500毫升，每个瓶内都加入相同量度的哈拉海粉末，为10.00g，其次，分别加入300毫升乙醇，放在温度不同的水浴中，分别是30、40、50、60、70、80摄氏度，经过五个小时之后，最后做检测工作，对吸光度进行评定。

④ 不同浸提时间试验

首先，需要选择六个相同量度的三角瓶，都是500毫升，每个瓶内都加入相同量度的哈拉海粉末，为10.00g，其次，分别加入300毫升乙醇，浓度为50%，放在温度为五十摄氏度的水浴中，经过的时间是不同的，分别是1、2、3、4、5、6小时，达到相应的时间之后，最后做检测工作，对吸光度进行评定。

2. 结果与分析

2.1 不同料液比对提取的影响

料液比和黄酮类化合物含量之间出现了先上升后下降的状况，在料液比1∶40的时候达到最高。超过此值则又下降。经过考虑提取结果及能耗，研究最佳比值为1∶30。

2.2 不同乙醇浓度对提取的影响

乙醇质量分数和黄酮类化合物吸光度变化达抛物线型变化，乙醇为50%的时候吸光度的数值达到最高。所以选取乙醇浓度50%的数值分数为最佳。

2.3 不同浸提温度对提取的影响

黄酮类化合物提取量随着温度的变化，也会有相应的变化，温度越高，提取量也会升高，但是在六十摄氏度以上时，开始呈现降低的趋势。

2.4不同浸提时间对提取的影响

浸提时间与黄酮类化合物得率的状态也是先上升后下降，当时间超过六个小时后，呈现下降的趋势。

2.5正交试验确定最佳提取条件

在单因素实验的基础上采用L9（34）正交试验表优化提取条件。

3. 结论

通过试验得出结论：选用乙醇溶液来提取锡林郭勒盟野生哈拉海中黄酮类化合物的影响因素主要有料液比、乙醇浓度、提取温度及时间。由正交试验确定提取工艺的最佳条件为A2B2C3D3，就是乙醇浓度50%、提取时间为五小时、温度为六十度、料液比1：30，所测出的一级提取率为82.5%。

项目基金：

锡林郭勒職业学院“锡盟地区哈拉海营养成分分析及其食用潜力开发初探”项目基金资助（YB-2019-02）

作者简介：

王智慧（1982-），女，内蒙古通辽人，全日制硕士研究生，教师，主要从事食品及生物方面研究工作。